Utilización de antibióticos como factor de estrés para el ingreso de H. pylori J99 en C. albicans ATCC10231.

Abstract

H. pylori es una bacteria patógena que afecta al 50% de la población mundial y se encuentra ampliamente asociada a enfermedades de alto impacto como cáncer gástrico y úlcera gastroduodenal. Actualmente se utiliza como tratamiento de erradicación la terapia clásica de primera línea, que consta de dos antibióticos (claritromicina y amoxicilina) junto con un inhibidor de la bomba de protones (generalmente omeprazol). Sin embargo, este tratamiento ha perdido efectividad con el tiempo debido a la aparición de cepas resistentes a claritromicina y metronidazol, lo cual la ha convertido en una bacteria de difícil erradicación. Por otro lado, se han reportado in vivo interacciones endosimbióticas de H. pylori en C. albicans (levadura de la microbiota normal), donde H. pylori se encuentra al interior de C. albicans, evitando con esto la acción de los antibióticos sobre la bacteria. Los factores que promueven este comportamiento aun no son del todo entendidos, sin embargo, se ha sugerido que el estrés sobre la bacteria podría gatillar los mecanismos asociados al ingreso, siendo estos aún desconocidos. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de claritromicina y amoxicilina (tratamiento de primera línea) como factor de estrés sobre H. pylori, en promover su ingreso a C. albicans. Mediante la determinación de curvas de crecimiento, tanto para H. pylori como para C. albicans, y la concentración mínima inhibitoria (CMI) de claritromicina y amoxicilina sobre H. pylori, se obtuvieron las condiciones para realizar cocultivos en condiciones sub-inhibitorias de cada antibiótico (¼ de la CMI experimental) por separado en caldo Brucella con 10% suero fetal bovino. La internalización de H. pylori en C. albicans fue evaluada utilizando microscopía de luz. Además, un subcultivo de C. albicans se aisló en agar Sabouraud y fue estudiada la presencia del gen ARNr 16S de H. pylori por PCR. Se encontraron levaduras que tenían solo 1 cuerpo parecido a bacteria al interior de estructuras membranosas internas (similares a vacuola). Este ingreso se registró en todos los experimentos realizados, sin embargo, un aumento significativo del 50% es detectado únicamente al realizar el co-cultivo en presencia de amoxicilina a las 24 h. Se confirmo la presencia de H. pylori por detección por PCR. Amoxicilina contribuye como factor de estrés en el ingreso de H. pylori a C. albicans.