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Título : Síntesis de polímeros impresos molecularmente (MIPs) en formato micro y nano métrico, para preconcentrar difenilamina y para ser utilizados como receptores en el test de ELISA.
Autor : Pereira Ulloa, Eduardo; supervisor de grado
Cáceres Fuentes, César Alejandro
Palabras clave : Polimerización;Reacciones Químicas;Test de Elisa - Investigacion;Pruebas Genéticas
Fecha de publicación : 2016
Editorial : Universidad de Concepción.
Resumen : El objetivo de este trabajo es la obtención y caracterización de polímeros impresos molecularmente (MIPs) en dos formatos (micro y nano métrico). Los MIPs son polímeros sintéticos que presentan un elevado grado de selectividad hacia la adsorción de un gran número de analitos. Este proceso de reconocimiento se basa en la formación de cavidades específicas dentro del MIP, que se forman durante el proceso de síntesis del mismo. En primera instancia la síntesis de MIPs en tamaño micrométrico tiene como fin obtener una herramienta que pueda ayudar a los cuerpos criminalísticos en la recolección de evidencia relacionada con el disparo de un arma y el posterior análisis de está evidencia. Para llevar esto a cabo se propone el desarrollo de MIPs en tamaño micrométrico para la retención de residuos orgánicos de disparo, en especial difenilamina (DFA). Para esto se sintetizaron MIPs y sus análogos no impresos molecularmente (NIPs), siguiendo una estrategia no covalente, llevada a cabo mediante polimerización radical en solución. Se utilizaron distintos tipos de monómeros y como molécula plantilla se utilizó DFA. Para tener una evaluación más clara de cómo las variables sintéticas influyen en las propiedades del material obtenido se utilizó un diseño de experimentos de compuesto central, con cuatro variables (cantidad de plantilla, entrecruzador, iniciador y solvente). Se verificó la capacidad de adsorción de los MIPs y NIPs mediante espectrometría UV-VIS y se estudió el mecanismo de adsorción mediante isotermas de adsorción y estudios cinéticos. En segunda instancia se realizó la síntesis de MIPs en tamaño nanométrico (nanoMIPs) con el objetivo de remplazar anticuerpos utilizados en el test de ELISA. Los analitos seleccionados son biotina (244,31 gmol-1) y melamina (126gmol-1). Para llevar a cabo la síntesis de los nanoMIPs se utilizó la estrategia de síntesis en fase sólida, donde se inmovilizan los analitos a una matriz sólida, en este caso perlas de vidrio, para luego llevar a cabo la polimerización. Se obtuvieron nanoMIPs con una composición similar para ambos analitos. La polimerización de nanoMIPs para biotina se llevó a cabo mediante iniciación química en agua. Para melamina se realizó la síntesis de nanoMIPs mediante iniciación química en agua y en paralelo se realizó la síntesis en medio orgánico con una posterior derivatización de los nanoMIPs obtenidos con PEG. Los nanoMIPs obtenidos se inmovilizaron en microplatos del test de ELISA, para luego llevar a cabo un estudio competitivo de ELISA entre los analitos (biotina y melamina) libres y conjugados con una enzima que revela la señal analítica para este test. Este ensayo presentó buenos resultados para los nanoMIPs sintetizados para biotina en agua, pero pésimos para melamina en agua. Este problema fue resuelto utilizando los nanoMIPs para melamina sintetizados en medio orgánico y derivatizados con PEG. Este estudio demuestra que con la preparación de nanoMIPs mediante síntesis en fase solida se pueden producir materiales con un alto grado de afinidad, y con potencial para remplazar anticuerpos en el test de ELISA. Esto demuestra lo versátil y aplicable que puede llegar a ser esta tecnología.
Descripción : Doctor en Ciencias con Mención en Química.
URI : http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/1966
Aparece en las colecciones: Ciencias Químicas - Tesis Doctorado

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