Estudio de la función de las proteínas Gαi2 y Ric-8A en la morfología y polarización celular durante la migración de células de la cresta neural craneal en xenopus.

Abstract

La cresta neural (NC) es una población de células embrionarias transitoria inducida en el borde de la placa neural que migra extensivamente para diferenciarse en otros tejidos durante el desarrollo. Se ha demostrado que Ric-8A, un GEF para la subunidad Gα de la proteína G heterotrimérica estaría regulando la migración de las células de Cresta Neural Craneal (CNC) en Xenopus. Por otro lado también se ha descrito que la proteína G heterotrimérica, a través de su subunidad Gα, estaría participando en procesos de migración en varios tipos celulares, pero sería específicamente la subunidad Gαi2 la que estaría controlando la distribución y quimiotaxia en distintos tipos celulares derivados del sistema inmune. Es por esta razón que en esta tesis se estudió la relación entre Gαi2 y Ric-8A en el mecanismo que controla la migración de las células de CNC. Para ello se evaluó el efecto de la pérdida y ganancia de función de Gαi2 y el rescate del fenotipo morfante para Ric-8A sobre la migración de las células de CNC in vivo e in vitro, donde se encontró que ambas proteínas estarían participando en la misma vía de señalización. Por otro lado también se encontró que Ric-8A y Gαi2 estarían colocalizando en el borde director de las células migratorias y además se encontrarían interaccionando o al menos formando parte de un complejo de interacción. Asimismo, las células morfantes para Ric-8A y Gαi2 presentaron cambios en la morfología celular, principalmente a nivel de la distribución del citoesqueleto de actina, la longitud de las protrusiones, y tubulina. Las células morfantes para Ric-8A presentaron además problemas a nivel de las adhesiones focales, siendo estas de menor número y área. Por otro lado las células morfantes para Gαi2 presentaron adhesiones focales de mayor longitud, en comparación a las células controles, además de defectos en la polaridad celular colectiva mediada por Rac1 y Par3. Estos resultados sugieren que Ric-8A, a través de la vía Gαi2, estaría controlando la migración de las células de CNC a través de la organización polarizada del citoesqueleto y dinámica de adhesiones focales.