Análisis funcional de Ric-8A en la polaridad celular durante la migración de la cresta neural en Xenopus tropicalis

Abstract

La cresta neural (CN) es una población celular embrionaria transitoria, pluripotencial y característica de vertebrados, que migra extensivamente durante el desarrollo embrionario. Se ha demostrado que Ric-8A, un factor intercambiador de nucleótidos de guanina (GEF) para diferentes subunidades Gα heterotriméricas, regula la migración celular de la CN craneal (CNC) en Xenopus mediante mecanismos que permanecen aún por dilucidar. Para migrar apropiadamente, las células de la CNC establecen un eje de polarización y se someten a cambios morfológicos para generar protrusiones en el borde director y retracción en la zona posterior. Este remodelamiento del citoesqueleto durante la migración es regulado por proteínas de la familia Rho GTPasas, las cuales requieren activación localizada y específica para regular la reorganización del citoesqueleto de actina y la contractibilidad de la actomiosina en las células que migran de forma direccionada. En esta tesis, nos propusimos estudiar el rol de Ric-8A en la polaridad durante la migración de las células de la CNC. Para ello, se evaluó el efecto de la pérdida y ganancia de función de Ric-8A sobre la localización espaciotemporal de Rac1 y RhoA activadas, y sobre la localización de las proteínas marcadoras de polaridad aPKC y Par3. Demostramos que las proteínas aPKC y Par3 pierden su localización con el silenciamiento de Ric-8A. Por otro lado, las proteínas Rac1 y RhoA activadas cambiaban su localización cuando se silencia o sobreexpresa Ric-8A. Por lo que los niveles de Ric-8A son críticos durante la migración y afectan la localización tanto de los marcadores de polaridad como de la localización subcelular de la actividad de las Rho GTPasas, sugiriendo que Ric-8A, probablemente a través de señalización mediada por proteína G heterotrimérica, regula la polaridad celular durante la migración de CNC.