Modulación de la función del Receptor de glicina α3 por la proteína de andamiaje AKAP79.

Abstract

La inhibición glicinérgica es crítica para el control de la respiración, la regulación del tono muscular y la nocicepción. Estudios previos han mostrado que la fosforilación vía PKA en el residuo S346 del dominio intracelular del receptor de glicina alfa 3 (RGli-α3) produce una disminución en la neurotransmisión glicinérgica en la médula espinal, la cual se relaciona con la generación y mantenimiento de estados asociados a dolor crónico de tipo inflamatorio. Sin embargo, los mecanismos moleculares que controlan la fosforilación del RGli-α3 aun no son claros. En este contexto, otros investigadores han mostrado que la interacción de la proteína de anclaje asociada a quinasa A (AKAP79) a canales iónicos que participan en el procesamiento del dolor es clave para la regulación de los eventos de fosforilación vía PKA. Por ejemplo, se ha reportado que el bloqueo de la interacción directa entre AKAP79 y TRPV1 disminuyó la sensibilización de neuronas nociceptivas, regulando fosforilación de residuos intracelulares. Por otro lado, se ha descrito la interacción directa entre AKAP79 y las subunidades β3 y β2 del receptor GABAA en residuos ubicados en el dominio intracelular del canal. Pese a su potencial importancia en dolor crónico, la potencial modulación del RGli por AKAP79 aún no ha sido investigada. Utilizando técnicas de inmunocitoquímica y pull-down, nuestros resultados sugieren que existe una interacción directa entre AKAP79 y RGli-α3. Análisis de imágenes mostraron que AKAP79 colocaliza con todas las subunidades α del RGli. Además, estudios de pull-down mostraron que el dominio intracelular de RGli-α3 (GST-ICD-RGli-α3) fue capaz de unirse a AKAP79. Finalmente, estudios electrofisiológicos mostraron que la sobreexpresión de AKAP79 no modifico parámetros funcionales básicos del RGli-α3. En conjunto, nuestros hallazgos sugieren que AKAP79 podría ser una pieza adicional para la correcta regulación intracelular del RGli-α3. Futuros experimentos en sistemas neuronales contribuirán a definir si AKAP79 es determinante para la función y modulación de RGli a nivel sináptico.