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Title: Beta-Lactamasas de espectro extendido presentes en cepas hospitalarias y extrahospitalarias de Klebsiella pneumoniae.
Authors: Bello Toledo, Helia Magaly , supervisora de grado
Trabal Fernández, Natalia
Keywords: Microbiología;Bacterias Patógenas
Issue Date: 2004
Publisher: Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento de Microbiología.
Abstract: Actualmente, en la especie bacteriana Klebsiella pneumoniae, se reconocen tres subespecies íntimamente relacionadas: pneumoniae, ozanae y rhinoscleromatis, consideradas patógenos oportunistas de significación clínica, cuya incidencia como causantes de enfermedades infecciosas se ha incrementado en las últimas dos décadas. Este incremento se debe, principalmente, a la expresión de -lactamasas de espectro extendido (LEEs), enzimas que confieren a dicha bacteria la capacidad de resistir la acción de cefalosporinas de tercera generación (C3G), como cefotaxima y ceftazidima, además, de monobactámicos como el aztreonam. Actualmente se considera a K. pneumoniae como uno de los principales microorganismos productores de LEEs derivadas de las familias TEM, SHV, y enzimas emergentes como CTX-M, PER y OXA. Además, constituye uno de los principales reservorios de genes que codifican resistencia a un amplio rango de antibióticos como -lactámicos, aminoglicósidos, cloranfenicol y tetraciclina, que tienen la capacidad de ser transferidos a otros grupos bacterianos. La emergencia y diseminación de cepas productoras de este tipo de enzimas constituye un serio problema en el tratamiento de enfermedades infecciosas causadas por este microorganismo, lo que, en gran medida, explica la alta incidencia de brotes epidémicos causados por cepas de K. pneumoniae a lo largo de todo el mundo, en los últimos diez años. Considerando la importancia de K. pneumoniae como causante de serias enfermedades infecciosas en Chile, la alta incidencia de aislamientos de cepas resistentes a C3G por producción de LEEs en el ambiente hospitalario y el desconocimiento que existe, a nivel mundial, de la frecuencia y tipo de -lactamasas en el ambiente extrahospitalario, el objetivo general de este trabajo fue determinar la presencia y tipo de LEEs en subespecies de K. pneumoniae de origen hospitalario y no hospitalario. Se identificaron 102 cepas hospitalarias y 51 extrahospitalarias aisladas en ciudades del centro y sur de Chile en los años 1998, 2002 y 2003. A estas cepas, se les determinó los patrones y niveles de resistencia a diferentes antibióticos -lactámicos (NCCLS, 2002). La presencia de LEEs se estudió mediante test screening y test confirmatorio siguiendo las recomendaciones del NCCLS (2002). La genotipificación de las cepas productoras de LEEs se realizó por ii electroforesis de campo pulsado y RFLP con XbaI. Los genes que codifican para las diferentes -lactamasas se detectaron a través de PCR. En las cepas hospitalarias y extrahospitalarias, un 92 % y 90 %, respectivamente, correspondió a la subespecie pneumoniae, las subespecies rhinoscleromatis y ozaenae fueron muy poco frecuentes. Las principales fuentes de aislamiento fueron orina, secreción bronquial y heridas. El 83 % de las cepas hospitalarias fue resistente a ampicilina; en cambio, la resistencia a cefalosporinas fue menor: 39,4 % a cefalotina, 27,7 % a cefuroxima y aproximadamente, un 23 % a cefpodoxima, cefotaxima y ceftazidima. No se aislaron cepas resistentes a imipenem. Los niveles más altos de resistencia fueron encontrados en las cepas de la subespecie pneumoniae. Las cepas hospitalarias de K. pneumoniae presentaron una frecuencia de síntesis de βLEEs del 24,5 %. La mayoría de esas cepas fueron resistentes al menos a una de las C3G. No obstante, se encontraron tres cepas que fueron susceptibles a dichos antibacterianos. Se encontraron 4 cepas de K. pneumoniae de origen extrahospitalario que sintetizan βLEEs. La mayoría de las cepas, tanto hospitalarias como extrahospitalarias, que presentaron βLEEs, pertenecen a aislamientos genéticamente diferentes. Mediante PCR e IEF, se detectaron βLEEs de los grupos: TEM, PER, SHV, CTX-M y GES en las cepas de origen nosocomial, mientras que los grupos: TEM y CTX-M, fueron detectados en las cepas de origen extrahospitalario. Las enzimas del tipo TEM y PER-2 fueron las encontradas con mayor frecuencia en las cepas hospitalarias de K. pneumoniae, las frecuencias fueron de 20/23 y 12/13, respectivamente. De las 23 cepas analizadas, 11 presentaron enzimas tipo SHV de espectro extendido y 7 presentaron β-lactamasas de la familia CTX-M. Una cepa hospitalaria de K. pneumoniae amplificó positivamente para el gen blaGES.. En las cepas de la comunidad, se encontraron enzimas del tipo TEM de espectro extendido, SHV-1 y CTX-M. Las cepas hospitalarias de K. pneumoniae presentan patrones enzimáticos compuestos al menos por dos βLEEs y algunas de ellas incluso, poseen patrones compuestos por 4 enzimas de este tipo. Se encontró, además, una cepa de origen hospitalario resistente a cefoxitina y que presenta el gen blaAmpC. En general, de los resultados obtenidos, se concluye que la subespecie pneumoniae fue predominante tanto en los hospitales como fuera de ellos. Por otra parte, las cepas de las tres subespecies de origen hospitalario presentan bajas frecuencias de resistencia frente a C3G, siendo las cepas de la comunidad mayoritariamente susceptibles. La producción de LEEs es una propiedad observada, principalmente, en las cepas hospitalarias, alcanzando frecuencias, claramente inferiores, a la informada para América del Sur. El hallazgo de cuatro cepas extrahospitalarias productoras de LEEs constituye un hecho importante, en la diseminación de este tipo de enzimas entre cepas aisladas de la comunidad. La resistencia presente en las cepas de K. pneumoniae intra y extra hospitalarias frente a las cefalosporinas de tercera generación y cuarta generación, está basada en la síntesis de un complejo enzimático constituido, generalmente, por más de un tipo de βLEEs. Los genes que codifican para LEEs en K. pneumoniae parecen ser diseminados horizontalmente, ya que las cepas constituyen aislamientos genéticamente diferentes.
Description: Tesis para optar al grado de Magíster en Ciencias Mención Microbiología.
URI: http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/6408
metadata.dc.source.uri: http://ezpbibliotecas.udec.cl/login?url=http://tesisencap.udec.cl/concepcion/cs_naturales/trabal_f_n/index.html
Appears in Collections:Departamento de Microbiología - Tesis Magíster

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