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Title: Estudio de la función de RIC-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración celular.
Authors: Torrejón Quezada, Marcela, supervisora de grado
Henríquez Hohmann, Juan Pablo, supervisor de grado
Beyer Soto, Andrea Wilma
Keywords: Movimiento Celular;Citoesqueleto de Actina;Polaridad Celular
Issue Date: 2021
Publisher: Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento de Biología Celular y Molecular.
Abstract: La migración celular, consistente en la traslación de las células o porciones de ellas de un lugar a otro, es un proceso altamente complejo que depende de la correcta coordinación de la extensión de la membrana plasmática, de la adhesión dinámica de la célula al sustrato y de la contracción de las fibras de actina – miosina, eventos que se basan en la remodelación del citoesqueleto. Estudios realizados en nuestro laboratorio y por otros grupos de investigación, vinculan la actividad de Ric-8A, una proteína con actividad GEF sobre diferentes subunidades Gα, con el proceso de migración celular. Ejemplo claro de ello es que el silenciamiento de Ric-8A en embriones de Xenopus tropicalis inhibe la migración de células de la cresta neural craneal, reduce el número de adhesiones focales establecidas, altera la polaridad celular y disminuye el tamaño de las protrusiones generadas. A pesar de la evidencia existente de los defectos celulares presentes en ausencia de Ric-8A, no se ha descrito en totalidad el mecanismo molecular mediante el cual esta proteína regula la migración y otros procesos celulares ligados a la estructuración del citoesqueleto. Es por ello, que en este trabajo se estudió la función de Ric-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración. A través del uso de ensayos de cierre de herida se determinó que la alteración de los niveles de expresión de Ric-8A provoca un aumento en la velocidad de migración de células NIH3T3 sin alterar la direccionalidad del movimiento. Además, se encontró que Ric-8A se concentra en los bordes de las protrusiones de diferentes tipos de células en migración. Al analizar el efecto de la deficiencia de Ric-8A en la adhesión célula - sustrato, no se encontró un efecto evidente sobre el número ni tamaño de adhesiones focales; sin embargo, se observó que las células carentes de Ric-8A se adhieren más rápido a fibronectina en comparación a las células control. En último lugar se procedió a realizar un análisis de espectrometría de masas para identificar a las proteínas que forma complejos con Ric-8A, encontrándose entre ellas proteínas Gα y, de forma interesante, a α-tubulina y vinculina. Estos resultados en conjunto sugieren que Ric8A controla la migración celular a través de la regulación de las vías de señalización dependientes de GTPasas y de su acción directa sobre proteínas componentes de las estructuras celulares que permiten la motilidad.
Description: Tesis para optar al grado académico de Doctor en Ciencias Biológicas, área Biología Celular y Molecular.
URI: http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/6651
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