Detección e identificación de Escherichia coli verotoxigénica serotipo O157 y no O157 utilizando una reacción de inmunoensayo tipo sándwich y PCR múltiple en muestras de heces y canales bovinas.

Abstract

Escherichia coli verotoxigénica (ECVT) es un patógeno emergente causante del síndrome hemolítico urémico (SHU). El serotipo O157:H7 es el más asociado a la presentación de esta enfermedad. El objetivo de este estudio fue identificar la presencia de ECVT serotipo O157 y no O157 aisladas desde heces y canales bovinas, mediante una reacción de inmunoensayo tipo sandwich (kit diagnóstico Transia card) y PCR múltiple. Tórulas con muestra fecal y esponjas con muestras de la superficie de canales se homogenizaron en 4ml y 20ml de agua peptonada tamponada respectivamente, para luego traspasarlas a una placa de agar Endo, incubándose a 37ºC por 24 horas. Las colonias E. coli, confirmadas por pruebas bioquímicas, se sometieron al kit diagnóstico Transia card para detección de E. coli O157 y PCR múltiple para identificación de los genes vt1, vt2, eaeA y H7. De un total de 130 bovinos, ECVT se identificó en un 24,6% y un 3,1% desde muestras de heces y canales respectivamente por la técnica de PCR múltiple. ECVT serotipo O157 se identificó sólo desde muestras de heces en un 15,6%. En muestras de heces el serotipo O157 presentó el perfil toxigénico vt1+vt2 en un 60% mientras que en el no O157 predominó vt1 (63%), en canales se identificó sólo vt1. ECVT fue más frecuentemente aislada de animales adultos (35,3%) que de animales juveniles en muestras de heces. E. coli serotipo O157 fue identificado en un 11,1% por el kit diagnóstico Transia card, mientras que un 7,9% se identificó por PCR múltiple. El ganado bovino es un reservorio de ECVT, principalmente del serotipo no O157 el que predominó tanto en muestras de heces como de canales