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http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/1000
Registro completo de metadatos
Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
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dc.contributor.advisor | Castro, Ariel; supervisor de grado | es |
dc.contributor.author | Palma Alarcón, Mario | es |
dc.date.accessioned | 2020-11-08T19:30:18Z | - |
dc.date.available | 2020-11-08T19:30:18Z | - |
dc.date.issued | 2019 | - |
dc.identifier.uri | http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/1000 | - |
dc.description | Tesis para optar al grado de Doctor en Ciencias Biológicas Área Biología Celular y Molecular, | es |
dc.description.abstract | NUAK1 es una serina/treonina quinasa miembro de la familia de AMPK-a. NUAK1 regula varios procesos involucrados en tumorigénesis, sin embargo, su regulación y blancos moleculares asociados a estos procesos son aún desconocidos. En este estudio se identificaron nuevos mecanismos moleculares involucrados en la regulación y función de NUAK1 que son dependientes de su localización sub-celular. Utilizando diversos análisis bioinformáticos y mutantes de NUAK1 identificamos una SLN-bipartita funcional conservada entre NUAK1 humano y murino que se localiza hacia la región N-terminal. Realizando análisis de espectrometría de masas y su respectiva validación determinamos que NUAK1 interacciona con la importina-b1, IPO7 y IPO9. Utilizando inhibidores para la importina-b1 y shRNAs para IPO7 y IPO9 validamos que todas ellas son requeridas para el transporte nuclear de NUAK1. Adicionalmente, determinamos que el estrés oxidativo inducido por peróxido de hidrógeno y privación de glucosa inducen la acumulación citoplasmática de NUAK1. Estos resultados determinaron un nuevo mecanismo de regulación de NUAK1 y además sugirieron que existen funciones dependientes de su localización sub-celular. Para evaluar esta idea, realizamos análisis de espectrometría de masas (MudPIT) de la fracción nuclear y citoplasmática de células iMEF expresando FLAGmNUAK1 WT y FLAG-mNUAK1 KR44/71AA, una mutante principalmente citoplasmática. Utilizando diferentes aproximaciones bioinformáticas identificamos potenciales funciones nucleares y citoplasmáticas de NUAK1 asociadas al procesamiento del ARN y al metabolismo de la glucosa. En esta área, se validó que hnRNPK es un nuevo interactor nuclear y potencial blanco de NUAK1 que regula el procesamiento del ARN. Por otro lado, la fosfoglicerato quinasa-1 (PGK1) y las tres isoformas (PFKP, PFKM y PFKL) de la Fosfofructoquinasa-1 (PFK1) son nuevos interactores y potenciales blancos citoplasmáticos de NUAK1 que regulan el metabolismo de la glucosa. La interacción de NUAK1 y PFKP fue modulada por la privación de glucosa y factores de crecimiento que afectaron la localización sub-celular de NUAK1, sugiriendo que el contexto celular es crucial para promover esta interacción. Con estos datos, evaluamos el efecto de NUAK1 sobre la actividad y/o función de PFK1, determinando que NUAK1 inhibe a la PFK, aumenta los niveles de NAPDH y disminuye el estrés oxidativo. Por lo tanto, proponemos que la quinasa NUAK1 regula el metabolismo de la glucosa y el estrés oxidativo, ya que conecta la glicólisis y la vía de las pentosas a través de la regulación de PFK1. Complementario a lo anterior, los péptidos de dos enzimas de la vía de las pentosas; 6PGL (Pgls) y TKT también fueron detectados en los datos de la espectrometría de masas. En resumen, debido a la relevancia de la regulación del metabolismo celular y el estrés oxidativo en la adaptación de las células cancerosas y su supervivencia, los resultados obtenidos sugieren que la inhibición de NUAK1 tiene una potencial aplicación terapéutica dependiendo del tipo de cáncer. | es |
dc.language.iso | spa | es |
dc.publisher | Universidad de Concepción. | es |
dc.rights | Creative Commoms CC BY NC ND 4.0 internacional (Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional) | - |
dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es | - |
dc.subject | Estrés Oxidativo | - |
dc.subject | Espectrometría de Masas | - |
dc.subject | Inmunofluorescencia | - |
dc.subject | Cancer | - |
dc.subject | Homeostasis | - |
dc.title | NUAK1 y cáncer: elucidando los mecanismos moleculares involucrados en la regulación y función de la quinasa NUAK1. | es |
dc.type | Tesis | es |
dc.description.facultad | Facultad de Ciencias Biológicas | es |
dc.description.departamento | Departamento de Biología Celular y Molecular. | es |
Aparece en las colecciones: | Departamento Biología Celular y Molecular - Tesis Doctorado |
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Fichero | Descripción | Tamaño | Formato | |
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