Inducción de la fase G0/G1 del ciclo celular en cultivo de fibroblastos de piel de gatos domésticos (Felis silvestris catus) y Guiñas (Leopardus guigna).

Abstract

La sincronización del ciclo celular de las células donantes juega un papel crucial en la transferencia nuclear somática (SCNT) y en el desarrollo de embriones clonados. En este estudio evaluamos el efecto de privación de suero (SS) e inhibición por contacto (CO), para la inducción de la quiescencia, y su efecto en la viabilidad celular de fibroblastos de piel de gato doméstico y guiña. Ambos tratamientos se evaluaron a los días 1, 3 y 5 de confluencia y células en crecimiento (GC) se usaron como grupo control. El análisis por citometría de flujo reveló que en los fibroblastos de gato doméstico, SS y CO aumentaron la cantidad de células en G0/G1 en comparación con GC. Además, sólo SS por 3 y 5 días y CO por 1 y 3 días aumentaron significativamente la proporción de células en G0/G1 en fibroblastos de piel de guiña. El análisis de viabilidad celular mostró una disminución significativa (p < 0,05) en las células que fueron sometidas a 5 días de SS en comparación a GC para ambas especies. El análisis de la expresión génica, no encontró diferencias en la ración BAX/ BCL2 entre SS, CO y GC en el gato doméstico. Sin embargo, en las células de guiña, la relación BAX/ BCL2 fue mayor en CO después de 3 días que en SS (P <0,05). En conclusión, CO después de 3 días tienen un efecto negativo en los fibroblastos de piel de guiña, posiblemente relacionados con una alta incidencia de apoptosis. Por esto, se sugiere SS durante 3 días para la sincronización del ciclo celular en guiñas. Estos resultados podrían ser relevantes para la producción de embriones de guiña por SCNT.