Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/4943
Registro completo de metadatos
Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
---|---|---|
dc.contributor.advisor | Olate Aravena, Juan; supervisor de grado | es |
dc.contributor.author | Romo Marty, Ximena Carolina | es |
dc.date.accessioned | 2021-04-08T00:51:03Z | - |
dc.date.available | 2021-04-08T00:51:03Z | - |
dc.date.issued | 2005 | - |
dc.identifier.uri | http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/4943 | - |
dc.description | Tesis para optar al grado de Doctor en Ciencias Biológicas, área Biología Celular y Molecular. | es |
dc.description.abstract | La hormona progesterona induce el proceso de maduración meiótica del ovocito de Xenopus laevis a través de un mecanismo de acción no genómico, el cual se caracteriza por ser un evento rápido en el tiempo y que involucra la inhibición del sistema efector adenilil ciclasa (AC). La participación de proteínas G en el proceso de maduración se basa principalmente en el hecho que el efecto inhibidor del esteroide es dependiente de GTP. Sin embargo, hasta el momento la identidad de la proteína G involucrada en este proceso no ha sido definida de manera directa, aunque posiblemente Gs sería el modulador involucrado. Recientemente se ha postulado que el heterodímero G de la proteína G también estaría directamente involucrado en el control del proceso de maduración, manteniendo activa la AC en forma constitutiva y por lo tanto bloqueando la entrada del ovocito a la transición G2/M del ciclo celular. Ha sido propuesto que progesterona actúa interfiriendo con la activación de la AC por Gs y G . En este trabajo de tesis se estudió cómo los cambios en los niveles de Gs afectan el proceso de maduración inducido por progesterona. Se encontró que la sobre expresión en el ovocito de la Gs silvestre de X. laevis y de la mutante constitutivamente activa GsQL, bloquearon la maduración inducida por progesterona, siendo más efectiva la mutante GsQL que la forma silvestre. Por otro lado, la depleción de la Gs endógena, utilizándose oligonucleótidos sin sentido, causó maduración espontánea del ovocito y activación de la vía MAPK. Estos resultados indican claramente que la presencia de Gs en el ovocito es necesaria para mantener el ovocito detenido en la interfase G2/M. Para analizar en mayor detalle la participación de Gs, se estudió el efecto de dos mutantes dominantes negativas para Gs. Se encontró que la mutante d-Gs acelera el proceso de maduración inducido por progesterona, y la mutante D-Gs causa maduración espontánea, sin embargo la coinyección de la subunidad G revierte el efecto inductor de la maduración de la dominante negativa, lo que indicaría que la dominante negativa estaría actuando como proteína secuestradora de G y no sería capaz de desacoplar a Gs endógena de un receptor activado. La sobre-expresión de receptores del tipo GPCR como el 2AR y los receptores muscarinícos M4 y M5, causaron una inhibición de la activación de la vía MAPK por progesterona. El efecto observado se debería a que estos receptores al ser activados por sus respectivos ligandos inducen la liberación de G desde su respectiva G, la cual junto con Gs-GTP, activan la AC. Para corroborar la participación de G en el proceso de maduración, se expresaron diferentes subunidades G, con el objeto de secuestrar G e inducir maduración. Se observó que Go induce el proceso de maduración, indicando que es un fuerte secuestrador de G. También se investigó el mecanismo por el cual progesterona podría estar afectando el intercambio GDP/GTP por parte de la proteína Gs. No se observó ningún efecto del esteroide sobre la capacidad de Gs de intercambiar nucleótido, incluso en un sistema activado por el ligando isoproterenol, indicando que progesterona no afecta directamente la función GEF del complejo hormona-receptor. Al respecto, se clonó desde ovocitos el cADN codificante para una xx proteína denominada sinembrina (xSin) y que posee actividad GEF. Se observó que la microinyección del ARNm para xSin bloqueó la maduración y su depleción por el uso de siARN aceleró el proceso, indicando la participación de esta proteína en la maduración meiótica. Basados en los resultados obtenidos en esta tesis se propone que Gs y G estarían participando en la mantención del estado inmaduro del ovocito, activando la AC y elevando los niveles de cAMP. Nosotros proponemos que el activador endógeno de Gs sería la proteína sinembrina, a través de su actividad GEF. Progesterona, a través de un mecanismo aún desconocido, interferiría con la función de sinembrina con la consecuente caída en los niveles de cAMP y maduración del ovocito. | es |
dc.language.iso | spa | es |
dc.publisher | Universidad de Concepción. | es |
dc.rights | Creative Commoms CC BY NC ND 4.0 internacional (Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional) | - |
dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es | - |
dc.source.uri | https://go.openathens.net/redirector/udec.cl?url=http://tesisencap.udec.cl/concepcion/sala-chile/romo_m_x/index.html | - |
dc.subject | Progesterona | - |
dc.subject | Proteínas G | - |
dc.subject | Ovulación. | - |
dc.title | Participación de proteínas-G en el proceso de maduración inducido por progesterona en ovocitos de xenopus laevis. | es |
dc.type | Tesis | es |
dc.description.facultad | Facultad de Ciencias Biológicas | es |
dc.description.departamento | Departamento de Biología Celular y Molecular. | es |
Aparece en las colecciones: | Departamento Biología Celular y Molecular - Tesis Doctorado |
Ficheros en este ítem:
Fichero | Descripción | Tamaño | Formato | |
---|---|---|---|---|
Tesis Romo_m_x.pdf | 56,98 kB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
Este ítem está sujeto a una licencia Creative Commons Licencia Creative Commons