Resumen:
En este estudio se desarrolló y optimizó un ensayo de Dot-blot utilizando 6
péptidos sintéticos de PRRSV; GP4 P1, GP4 P2, GP5 P1, GP5 P3, GP5 P12 y
GP5 P29 para la detección de anticuerpos específicos en 26 muestras de sueros
provenientes de cerdas viejas, cerdos de crecimiento y cerdos de engorda
pertenecientes a 4 granjas comerciales de la provincia de Alberta en Canadá.
Cada péptido representa a un epítopo inmunogénico neutralizante contenido en
proteínas de envoltura de PRRSV tipo 1 y tipo 2. Los dos primeros péptidos
fueron utilizados para la optimización del ensayo de Dot-blot y los cuatro últimos
para detectar anticuerpos específicos en muestras de suero de cerdos. Cada
muestra de suero fue diluida utilizando un rango de concentraciones seriadas
desde 0.000625 hasta 0.005. Los resultados de la optimización mostraron que la
concentración óptima de antígeno, el rango de diluciones óptimo para las
muestras de suero, y la óptima dilución para el anti-suero para este estudio fueron
respectivamente: 100 ng/well; 1:200 a 1:1600 y 1:10000. El nivel de concordancia
entre los resultados originales de las muestras de suero evaluadas en ELISA y los
obtenidos en Dot-blot, fue de discreto a moderado para las categorías de cerdos,
testeadas contra todos los péptidos. Las cerdas mostraron títulos de anticuerpos
más altos que los cerdos jóvenes hacia todos los péptidos, siendo esta tendencia
más marcada para el péptido GP5 P1. Se demostró que el ensayo de Dot-blot es
una valiosa técnica de diagnóstico para detectar anticuerpos específicos contra
péptidos sintéticos pequeños.