Evaluación de protocolos de inactivación de cepas de Helicobacter pylori y su efecto sobre integridad de membrana y citotoxicidad sobre la línea celular AGS.

Abstract

Debido a que Helicobacter pylori presenta elevada resistencia antimicrobiana, se ha establecido como un microorganismo de alta prioridad para la Organización mundial de la salud. A raíz de esto, consensos internacionales han establecido los beneficios de desarrollar una vacuna contra el patógeno. Sin embargo, las distintas vacunas desarrolladas han fallado debido a la plasticidad de esta bacteria. Con el fin de ofrecer una alternativa terapéutica, este estudio se centró en la estandarización de los primeros pasos para el desarrollo de una autovacuna contra H. pylori, definida como vacunas constituidas por una cepa inactivada previamente aislada desde el paciente que presentó el foco infeccioso. Para esto, se estandarizaron protocolos de inactivación basados en calor, formaldehido, NaOH y etanol y se evaluó su capacidad para inhibir el crecimiento de 5 cepas clínicas y 2 cepas comerciales de H. pylori, obteniendo una completa inhibición mediante los cuatro protocolos. Por otra parte, también se evaluó la agresividad de estos protocolos sobre la membrana mediante microscopía de fluorescencia y de barrido, donde los protocolos mediados por formaldehido y etanol presentaron un menor daño a nivel de la integridad de membrana. Finalmente, se evaluó la citotoxicidad de las muestras mediante Sulforodamina B, donde al utilizar una densidad celular McFarland 1, los protocolos que presentaron una menor citotoxicidad fueron los mediados por calor y formaldehido. Los resultados obtenidos sugieren que el protocolo más prometedor son los mediados por formaldehido.