Respuesta de queratinocitos frente a la interacción con diferentes serotipos de Aggregatibacter actinomycetemcomitans: aspectos inflamatorios y osteodestructivos.

Abstract

La microbiota de la cavidad oral está compuesta por variados biofilms con diferentes características determinadas en función de las propiedades (pH, disponibilidad de nutrientes, cantidad de oxígeno, etc.) del nicho ecológico donde se desarrollan. En este sentido, existe una fuerte relación entre las características cualitativas de las biopelículas orales y los estados clínicos de salud y enfermedad, donde el equilibrio u homeostasis de estos biofilms puede ser modificado, alcanzando un potencial patogénico asociado al desarrollo de enfermedades orales de alta prevalencia, tal como caries, gingivitis, periodontitis, mucositis o periimplantitis. En el caso de la periodontitis, definida como una inflamación de los tejidos de soporte del diente, con destrucción del ligamento periodontal y hueso alveolar, diferentes patógenos han sido asociados con la progresión y severidad de esta patología, de los cuales Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans son considerados patógenos claves, los cuales teniendo condiciones favorables de crecimiento, tienen un rol protagónico en la generación de un microambiente disbiótico que favorece el inicio y progresión de la patología ya mencionada A. actinomycetemcomitans, un cocobacilo Gram negativo, no móvil, anaerobio facultativo y capnofílico presenta 7 serotipos (a-g) en función de las variantes estructurales de su lipopolisacardio (LPS). De estos, los serotipos a, b y c son los de mayor prevalencia a nivel oral, el serotipo b ha sido aislado desde pacientes con periodontitis, el serotipo a de individuos con o sin signos de periodontitis y el c con mayor frecuencia en individuos sanos. Esta distribución, resulta indicativa de una virulencia heterogénea y un mayor potencial inmunogénico por parte del serotipo b, donde abundante evidencia sustenta la idea de que este serotipo resulta más virulento que los otros ya mencionados, determinando respuestas diferenciales de mayor magnitud como producción de citoquinas, receptores de quimioquinas, estimulación de células precursoras de osteoclastos, entre otras, comparado con los serotipos a y c. Esta respuesta diferencial frente a los serotipos de A actinomycetemcomitans descrita anteriormente, también ha sido estudiada en células del estroma periodontal como células epiteliales, específicamente queratinocitos; sin embargo, la totalidad de los aspectos de dicha respuesta, y cómo ésta influye en los fenómenos inflamatorios y osteodestructivos, no está del todo definida. Por esta razón, la presente investigación tiene como objetivo evaluar la respuesta de queratinocitos frente a los diferentes serotipos de A. actinomycetemcomitans y determinar la importancia de esta respuesta en el desarrollo de los aspectos inflamatorios y osteodestructivos, hipotetizando que al igual que en otros tipos celulares el serotipo b de A. actinomycetemcomitans es también capaz de inducir respuestas diferenciales en células epiteliales. Para este objetivo, se utilizó como línea celular de estudio la línea de queratinocitos OKF6/TERT2, estimulados con los serotipos a, b y c de A. actinomycetemcomitans, evaluando por PCR la de citoquinas pro-inflamatorias, moléculas inductoras de destrucción tisular dependientes y expresión de receptores tipo toll. Sumado a lo anterior, se estimularon también células macrofágicas de la línea THP-1, con el fin de contrastar si esta capacidad de respuesta diferencial era exclusiva de células inmunes especializadas, o bien era transversal a cualquier tipo celular, como células epiteliales o de la inmunidad innata. De estas experiencias y considerando lo que plantea la evidencia disponible para otros tipos celulares, se demostró que la respuesta tanto de queratinocitos como de células macrofágicas en torno a la producción de citoquinas, expresión de receptores TLR, moléculas de destrucción tisular y moléculas de polarización de macrófagos, frente a A. actinomycetemcomitans no presenta - al menos en términos de expresión génica - una respuesta serotipo dependiente, sino que es una respuesta genérica, cuyo rol sería actuar como primera señal de alarma para el reclutamiento de células capaces de discriminar estas diferencias estructurales y montar una respuesta inmune más específica en función del patógeno frente al cual se está respondiendo, siendo esta respuesta solo una primera “ola” de citoquinas capaz de activar la respuesta inflamatoria sin una especificidad determinada.