Nova Lamperti, Estefanía AndreaVera Araya, Agustín Andrés2024-11-132024-11-132024https://repositorio.udec.cl/handle/11594/7426Tesis presentada para optar al título profesional de BioquímicoLa Vitamina D es una hormona liposoluble que participa principalmente en la regulación del metabolismo del calcio y el fosforo, sin embargo, también es capaz de modular el sistema inmunológico, tanto a nivel de respuesta innata como adaptativa, y promover principalmente los linajes T helper (Th) de tipo Th2 y Treg. El metabolismo del linfocito Th activado es principalmente glucolítico, utilizando la glucosa como fuente principal de energía para sustentar sus procesos proliferativos. En presencia de Vitamina D, se ha observado un aumento en el recuento celular de los linfocitos T CD4+ activados, pero una disminución en la captación de glucosa y producción de lactato, dejando la interrogante de cuál vía metabólica podría estar otorgando energía a expensas de la reducción de la vía glucolítica. La Glutaminólisis es una vía metabólica asociada a la proliferación celular de linfocitos T que se basa en la obtención de energía mediante la degradación de la glutamina. El objetivo de este trabajo es analizar la participación de la Glutaminólisis sobre el recuento, viabilidad y transporte de glutamina en linfocitos T CD4+ activados en presencia de Vitamina D. Para ello, se extrajeron linfocitos T CD4+ de sangre periférica de donantes sanos y se activaron con anti-CD3/CD28 en presencia o ausencia de Vitamina D. El efecto de la Vitamina D sobre la expresión de enzimas que participan en la Glutaminólisis y el transportador de glutamina, además del efecto de los inhibidores de la Glutaminólisis sobre el recuento celular, se analizaron por proteómica y citometría de flujo en linfocitos T CD4+. El transporte de glutamina en presencia de Vitamina D se midió en linfocitos T CD4+ utilizando glutamina marcada con tritio en un contador de centelleo. Los resultados revelaron un aumento en el recuento celular y una disminución de la glucólisis en linfocitos T CD4+ en presencia de Vitamina D al cuarto día de activación. Resultados proteómicos revelaron un aumento en la cuantificación de dos enzimas claves de la Glutaminólisis, la Glutaminasa y la Glutamato deshidrogenasa, al igual que la expresión del transportador ASCT2 en presencia de Vitamina D. Inhibidores de la Glutaminólisis, GPNA, Inh 968 y BPTES, redujeron el recuento celular en linfocitos T CD4+ en presencia de Vitamina D. Finalmente, el transporte de glutamina se vio aumentado en linfocitos T CD4+ en presencia de Vitamina D. En conclusión, nuestros resultados demostraron que tras la reducción de la vía glucolítica en los linfocitos T CD4+ activados en presencia de Vitamina D, estos reprograman su metabolismo hacia uno glutaminolítico, compensando el alto requerimiento energético de la proliferación celular.esCC BY-NC-ND 4.0 DEED Attribution-NonCommercial-NoDerivs 4.0 InternationalLinfocitos tVitamina DCélulas MetabolismoThesis