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http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/5366
Title: | Generación y evaluación in vitro de variantes aglicosiladas de eritropoyetina. |
Authors: | Sánchez Ramos, Oliberto; supervisor de grado Varas Molina, Nicolás Mauricio Jeset |
Keywords: | Eritropoyetina;Electroforesis;Proteínas Recombinantes;Enzimas;Análisis |
Issue Date: | 2018 |
Publisher: | Universidad de Concepción. |
Abstract: | La eritropoyetina humana (hEPO) es la principal hormona encargada de estimular la eritropoyesis. Su deficiencia causa anemia severa y ocurre en pacientes con fallo renal debido a traumas, trasplantes, quimioterapia, diabetes u otros. Para el tratamiento de estos pacientes es necesario el suministro externo de la hormona. En la actualidad la eritropoyetina humana recombinante (rhEPO) es producida en cultivo de células CHO, a pesar del alto costo, debido a que la producida en otras células u organismos presenta glicosilaciones diferentes y por tanto una actividad in vivo disminuida. Una alternativa podría ser utilizar rhEPO sin glicosilaciones, sin embargo, esta variante posee una actividad in vivo casi nula, a pesar de poseer una mayor actividad in vitro y mayor afinidad por su receptor (EPOR) que la hEPO nativa. Las glicosilaciones generan limitaciones en la producción de la rhEPO y las principales ventajas que le otorgan a la hormona son un aumento de peso molecular y una disminución de la afinidad por EPOR. Considerando esto, en el presente trabajo generamos y evaluamos variantes de rhEPO aglicosilada, fusionada al dominio Fc de IgG1 humana y con mutaciones en los aminoácidos que interactúan con el receptor. Finalmente evaluamos las variantes generadas mediante ensayo in vitro en la línea celular TF-1 y obtuvimos que el cambio de fenilalanina 48 por alanina genera una proteína que recupera un comportamiento in vitro similar a una rhEPO glicosilada. |
Description: | Tesis para optar al grado de Magíster en Bioquímica y Bioinformática. |
URI: | http://repositorio.udec.cl/jspui/handle/11594/5366 |
metadata.dc.source.uri: | https://go.openathens.net/redirector/udec.cl?url=http://tesisencap.udec.cl/concepcion/varas_m_n/index.html |
Appears in Collections: | Departamento de Bioquímica y Biología Molecular - Tesis Magíster |
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