Resumen:
El Síndrome Cardiopulmonar causado por Hantavirus (SCPH) es una enfermedad
endémica de Chile y de elevada mortalidad. En nuestro país, el virus Andes es el agente
etiológico de esta patología. Su transmisión ocurre principalmente por contacto con
excreciones y secreciones de roedores infectados, pero en el caso particular del virus
Andes también es posible la transmisión de persona a persona. Actualmente, no existen
vacunas ni tratamientos para esta patología. Sin embargo existe evidencia que demuestra
que anticuerpos neutralizantes contra las glicoproteínas Gn y Gc de Hantavirus son
suficientes y necesarios para proteger de la infección y desarrollo de SCPH en hámsteres
sirios, modelo animal de esta enfermedad.
Con el objetivo de desarrollar una vacuna contra SCPH, se desarrollaron distintos
antígenos para ser probados como candidatos vacunales. Inicialmente, se diseñaron
antígenos consistentes en los dominios expuestos de las glicoproteínas Gn y Gc de virus
Andes, denominados sGn y sGc. Fueron expresados en células de mamíferos
transducidas con un vector adenoviral y posteriormente purificados. Los antígenos fueron
reconocidos por el suero de pacientes sobrevivientes de SCPH. Sin embargo, los bajos
niveles de expresión de los antígenos limitan el uso de estos como candidato vacunal. En
vista de estos resultados, los antígenos fueron modificados para su expresión en
levaduras, denominados Gns y Gcs. Al ser co-expresados, los antígenos Gns y Gcs
parecen formar agregados de alto peso molecular y altamente estables. Ambos antígenos
fueron solubilizados, purificados y posteriormente replegados. En paralelo, se trabajó en
un antígeno recombinante basado en epítopes lineales presentes en las proteínas Gn, Gc
y N de virus Andes. Este antígeno, denominado AndesVac, fue expresado de manera
insoluble en bacterias. El antígeno AndesVac solubilizado fue purificado con una pureza
superior al 95% luego de un único paso de IMAC.
Finalmente, los antígenos purificados fueron empleados en un ensayo de
inmunización en hámsteres sirios. Tanto el complejo antigénico Gns-Gcs como AndesVac,
fueron capaces de inducir una respuesta de anticuerpos IgG totales significativa. La
formulación capaz de generar mayores títulos de anticuerpos neutralizantes consiste en el
complejo antigénico Gns-Gcs adyuvado con Alhydrogel, la cual también generó títulos
significativos de anticuerpos neutralizantes y una elevación de los niveles relativos de
ARNm de las citoquinas IL-12, IFN-γ e IL-6.