Resumen:
El glioblastoma es uno de los tumores más agresivos, con una media de
supervivencia de 15 meses después del diagnóstico y tratamiento. Son altamente
invasivos y su agresividad se debe, en parte, a la presencia de células troncales
que aumentan la resistencia oxidativa al daño por radio y quimioterapia. Estos
tumores, modifican su metabolismo, incrementando la expresión de
transportadores de glucosa, GLUTs, los cuales incorporan glucosa y la forma
oxidada de la Vitamina C, el ácido dehidroascórbico (DHA). Además, se
desconocen los niveles de expresión y la función de SVCT2, el transportador de
ácido ascórbico (AA, vitamina C reducida), en estos tumores. Los antecedentes
bibliográficos indican que los glioblastomas se adaptan para aumentar su
defensa antioxidativa, optimizando la captación de vitamina C. De esta forma
hemos propuesto como hipótesis que “las células de glioblastoma incorporan
preferentemente la forma oxidada de la vitamina C (DHA), esta molécula es
reducida intracelularmente, favoreciendo la defensa antioxidativa, la biosíntesis
de colágeno y además, potenciando un fenotipo agresivo”. Para el estudio de
esta Tesis, desarrollamos los siguientes objetivos específicos: i) determinar si la
forma de vitamina C (AA o DHA) preferentemente captada por las células
U87MG, HSVT-C3 y RAV27 (derivadas de glioblastoma humano), modifican la
defensa antioxidativa y la migración celular in vitro; ii) definir si bajas
concentraciones de vitamina C in vivo, tienen efecto sobre la angiogénesis e invasividad de los glioblastomas inducidos en el parénquima cerebral de
cobayos. Nuestros resultados mostraron que las células de glioblastoma
expresan GLUT1, GLUT3 y SVCT2. Los tres tipos celulares captan casi
exclusivamente DHA a través de GLUT1. GLUT3 y SVCT2 se encuentran
preferentemente intracelular. Utilizando un sistema de baculovirus y análisis
bioquímicos de sub-fraccionamiento celular, definimos que SVCT2 está
preferentemente en el RER. Esta forma de SVCT2, corresponde a una isoforma
corta que no alcanza la membrana celular. Observamos que AA es
compartimentalizado, estimulando la biosíntesis de colágeno IV, y además, su
secreción. Vitamina C incrementa la migración de células que secretan colágeno,
in vitro e in situ. Finalmente, al inducir tumores en cerebros de cobayos
inmunocompetentes, con células U87 (tumor mesenquimático) y C3 (tumor de
célula troncal), observamos que el escorbuto (déficit de vitamina C) retiene
intracelularmente el colágeno biosintetizado por las células tumorales, reduce la
invasión de los vasos sanguíneos (migración/co-optación) y afecta la formación
de vasculatura glomeruloide, condiciones patológicas asociadas a malignidad.
En esta Tesis, mostramos el rol funcional de la vitamina C en el desarrollo del
glioblatoma.