Rol funcional de la vitamina C en el desarrollo y progresión del glioblastoma.

Abstract

El glioblastoma es uno de los tumores más agresivos, con una media de supervivencia de 15 meses después del diagnóstico y tratamiento. Son altamente invasivos y su agresividad se debe, en parte, a la presencia de células troncales que aumentan la resistencia oxidativa al daño por radio y quimioterapia. Estos tumores, modifican su metabolismo, incrementando la expresión de transportadores de glucosa, GLUTs, los cuales incorporan glucosa y la forma oxidada de la Vitamina C, el ácido dehidroascórbico (DHA). Además, se desconocen los niveles de expresión y la función de SVCT2, el transportador de ácido ascórbico (AA, vitamina C reducida), en estos tumores. Los antecedentes bibliográficos indican que los glioblastomas se adaptan para aumentar su defensa antioxidativa, optimizando la captación de vitamina C. De esta forma hemos propuesto como hipótesis que “las células de glioblastoma incorporan preferentemente la forma oxidada de la vitamina C (DHA), esta molécula es reducida intracelularmente, favoreciendo la defensa antioxidativa, la biosíntesis de colágeno y además, potenciando un fenotipo agresivo”. Para el estudio de esta Tesis, desarrollamos los siguientes objetivos específicos: i) determinar si la forma de vitamina C (AA o DHA) preferentemente captada por las células U87MG, HSVT-C3 y RAV27 (derivadas de glioblastoma humano), modifican la defensa antioxidativa y la migración celular in vitro; ii) definir si bajas concentraciones de vitamina C in vivo, tienen efecto sobre la angiogénesis e invasividad de los glioblastomas inducidos en el parénquima cerebral de cobayos. Nuestros resultados mostraron que las células de glioblastoma expresan GLUT1, GLUT3 y SVCT2. Los tres tipos celulares captan casi exclusivamente DHA a través de GLUT1. GLUT3 y SVCT2 se encuentran preferentemente intracelular. Utilizando un sistema de baculovirus y análisis bioquímicos de sub-fraccionamiento celular, definimos que SVCT2 está preferentemente en el RER. Esta forma de SVCT2, corresponde a una isoforma corta que no alcanza la membrana celular. Observamos que AA es compartimentalizado, estimulando la biosíntesis de colágeno IV, y además, su secreción. Vitamina C incrementa la migración de células que secretan colágeno, in vitro e in situ. Finalmente, al inducir tumores en cerebros de cobayos inmunocompetentes, con células U87 (tumor mesenquimático) y C3 (tumor de célula troncal), observamos que el escorbuto (déficit de vitamina C) retiene intracelularmente el colágeno biosintetizado por las células tumorales, reduce la invasión de los vasos sanguíneos (migración/co-optación) y afecta la formación de vasculatura glomeruloide, condiciones patológicas asociadas a malignidad. En esta Tesis, mostramos el rol funcional de la vitamina C en el desarrollo del glioblatoma.