Resumen:
Los órganos son unidades funcionales compuestas por distintos tipos de tejidos,
los cuales se forman a través de agrupaciones de células que de manera
coordinada toman configuraciones naturalmente tridimensionales (3D). Para lograr
comprender de mejor forma estas estructuras, se utiliza microscopía volumétrica,
la cual a su vez depende del nivel de transparencia de los tejidos, lograda a través
de técnicas de aclaramiento óptico. Existe una gran variedad de técnicas de
aclaramiento, todas tienen como objetivo homogeneizar los índices de refracción
en los diferentes compartimientos celulares, pero difieren en cuanto a los niveles
de compatibilidad con tinciones fluorescentes y a la deformidad que producen en
los tejidos. En este trabajo buscamos implementar y comparar distintas técnicas
de aclaramiento (SeeDB-SeeDB2G-RTF-FOCM-FRUIT) utilizando tejido hepático
de ratón como modelo. SeeDB y FOCM produjeron las menores alteraciones
morfométricas tanto a nivel macro como micrométrico. Mientras todos los
aclaramientos mostraron compatibilidad con tinciones mediadas por anticuerpos,
solo algunos tuvieron buen desempeño con moléculas fluorescentes pequeñas
como el DAPI. Solo SeeDB mostró compatibilidad con todos los colorantes
estudiados. La elección de la correcta técnica de aclaramiento tiene un impacto
directo en la adquisición de imágenes por microscopía volumétrica y la generación
de reconstrucciones 3D, facilitando así el entendimiento de tejidos como el hígado,
el cual presenta una organización 3D compleja.