Browsing by Author "Carrera Naipil, Crisleri Dayan"

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    Caracterización funcional de péptidos antimicrobianos de NK-Lisina de Salmo salar.
    (Universidad de Concepción, 2026) Carrera Naipil, Crisleri Dayan; Acosta Alba, Jannel; Montesino Seguí, Raquel
    El desarrollo de vacunas eficaces para la acuicultura es crucial para prevenir enfermedades infecciosas y mejorar la salud de los peces. En la salmonicultura, se utilizan comúnmente vacunas inactivadas y de subunidades; sin embargo, su inmunogenicidad suele ser limitada, por lo que requieren adyuvantes para aumentar su eficacia. En este contexto, se identificaron y caracterizaron variantes adicionales de NK-lisina en Salmo salar, así como su distribución en tejidos inmunes como branquias, bazo y riñón cefálico, donde presentan alta expresión, lo que sugiere un papel relevante en la defensa inmunológica. Los péptidos derivados de NK-lisina mostraron actividad antimicrobiana contra patógenos relevantes en acuicultura, como Piscirickettsia salmonis y Flavobacterium psychrophilum, además de actividad inmunomoduladora tanto in vitro como in vivo. Estos péptidos regulan la expresión de citoquinas asociadas a respuestas inmunes innata y adaptativa, incluyendo perfiles Th1, Th2 y Th17. Asimismo, pueden modular respuestas inducidas por patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs), potenciando la expresión de genes antivirales como IFN-γ y Mx frente a poli (I:C), y regulando la respuesta inflamatoria frente a LPS. También se ha observado un aumento en la actividad fagocítica de leucocitos del riñón cefálico, aunque con efectos variables según el péptido evaluado. Debido a su baja toxicidad relativa y a su capacidad de modular la respuesta inmune, estos péptidos también han sido evaluados como adyuvantes vacunales. En formulaciones con el antígeno VP2 del virus IPNv, los péptidos SsNK127 y SsNK427 incrementaron la producción de IgM y potenciaron respuestas inmunes humorales y celulares, sugiriendo la activación coordinada de respuestas Th1, Th2 y Th17. En conjunto, estos resultados indican que los péptidos derivados de NK-lisina no solo poseen actividad antimicrobiana directa, sino también un fuerte potencial inmunoestimulante y adyuvante, lo que los posiciona como candidatos prometedores para mejorar vacunas y el control de enfermedades en la acuicultura del salmón.
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    Evaluación funcional de miRNA implicados en el proceso infectivo y reproductivo de Caligus rogercresseyi.
    (Universidad de Concepción, 2019) Carrera Naipil, Crisleri Dayan; Gallardo Escárate, Cristian Jorge; Morín Muñoz, Violeta Marilyn del Carmen
    Caligus rogercresseyi es uno de los ectoparásitos más prevalentes en la industria del salmón en Chile. Uno de los aspectos más importante de un patógeno es una capacidad de infección y reproducción. Existe evidencia que proteínas del secretoma como serpinas, tripsinas y catepsinas juegan un rol importante en la infección de un patógeno y en la interacción patógeno-hospedero. Así como otras proteínas son de importancia durante los procesos reproductivos como vitelogenina. Los avances en genómica funcional ha permitido la caracterización de genomas en especies no-modelos y específicamente de su fracción transcrita. En este punto, RNAs no-codificantes han emergido cómo los principales componentes moleculares con roles regulatorios de la expresión génica. El objetivo de este estudio fue determinar la modulación de miRNAs sobre genes de relevancia en el proceso infectivo y reproductivo de caligus. Esto se llevó a cabo mediante el estudio de predicción de interacciones entre serpina, catepsina y tripsina con el miRNA Bantam y para vitelogenina I con mir-996. Se realizó una búsqueda de secuencias en librería de cDNA específica para caligus, utilizando herramientas bioinformáticas. Para predecir los genes dirigidos por miRNAs se utilizaron los algoritmos: PITA, StarMir, RNAHidryd. La expresión diferencial entre estadios de desarrollo se realizó por qPCR. Las secuencias 3’UTR diana para la unión al miRNA fueron clonadas y secuenciadas en el vector pmirGLO. A partir de esta construcción se realizó el ensayo funcional para medir los niveles de unión del miRNAs con su secuencia diana mediante la inhibición de la expresión del gen reportero. En la evaluación de expresión por qPCR se observó para Cr_Catepsina, Cr_Tripsina y Cr_Vitelogenina, una mayor expresión en hembra, mientras que Cr_Serpina se encuentra altamenteexpresado en estado de nauplius. Según los análisis de predicción Bantam se uniría al mRNA de catepsina, serpina y tripsina con una energía de hibridación de -15,6, - 22,7 y -20,7 kcal/mol respectivamente. Para vitelogenina I fue de -10,9 kcal/mol para mir-996. Estos resultados fueron verificados in vitro en el cual no se observó ningún efecto de bantam en la actividad de la luciferasa para Cr_Serpina y Cr_Catepsina mientras que para tripsina bantam logra disminuir la actividad de la luciferasa en un 50%. Lo mismo ocurrió para vitelogenina I en el cual se observó una disminución en un 30%. De acuerdo a estos resultados se puede concluir que bantam estaría regulando de manera post-transcripcional proteínas del secretoma de C.rogercresseyi, las cuales podrían tener una función en el proceso infectivo. Además, mir-996 también podría estar participando en la regulación post-trancripcional de vitelogenina I, un gen clave en la reproducción de C. rogercressey
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