Efecto de la vitamina C en modelo de hipoxia in vitro con células endoteliales microvasculares de cerebro humano y en modelo de accidente cerebrovascular isquemico in vivo con ratones gulo knockout.
| dc.contributor.advisor | Rivas Rocco, Coralia Isabel | es |
| dc.contributor.advisor | Inostroza Pérez, Eveling Grace | es |
| dc.contributor.author | Arriagada Cancino, Solange Pilar | es |
| dc.date.accessioned | 2026-08-12T15:46:40Z | |
| dc.date.available | 2026-08-12T15:46:40Z | |
| dc.date.issued | 2022 | |
| dc.description | Tesis presentada para optar al título de Bioquimico/a. | es |
| dc.description.abstract | Los Accidentes cerebrovasculares (ACV) afectan a 15 millones de personas al año a nivel mundial, donde un tercio de estas fallece y el otro tercio queda con secuelas permanentes. En chile es la principal causa de muerte y el 60% de los casos son de tipo isquémico, se producen debido a la oclusión de una arteria cerebral que impide el flujo normal de la sangre generando una reducción de la concentración de nutrientes y oxígeno. Esta disminución de oxígeno desencadena diferentes mecanismos a nivel celular los cuales dan como consecuencia un desbalance redox con un aumento de los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS), generando altos niveles de estrés oxidativo que provocan daño y muerte celular a nivel cerebral. Dentro de las células que se ven afectadas por el ACV se encuentras las células endoteliales, las cuales son parte de la unidad neurovascular de la barrera hematoencefálica (BHE) y son las encargadas de formar el endotelio vascular y regular el paso de sustancias entre la sangre y el cerebro, por lo que la muerte de las células endoteliales vasculares cerebrales facilita la destrucción de la integridad y función de la BHE. Como en el ACV la muerte celular es desencadenada por el aumento del ambiente oxidante se infiere que regular el aumento de estrés oxidativo puede podría ser un posible blanco terapéutico. Para combatir el daño oxidativo existen los antioxidantes como la vitamina C, la cual no es producida endógenamente por los humanos, esta presenta su forma reducida como ácido ascórbico (AA) y en su forma oxidada como ácido dehidroascorbico (DHA). El AA es un potente reductor capaz de neutralizar radicales libres y presenta transportadores en diferentes órganos llamados SVCTs. Hay evidencia científica de que los transportadores SVCT2 aumentan su expresión en procesos isquémicos en células de endotelio cerebral de ratón, por lo cual en el presente estudio nos planteamos como objetivo determinar la capacidad de la vitamina C para revertir el daño y muerte celular causado por hipoxia en células de endotelio microvascular de cerebro humano. Para esto se estandarizará un modelo de hipoxia in vitro que consiste en un cultivo de células de endotelio microvascular humano que al diferenciarlas son capaces de expresar uniones estrechas características de una barrera hematoencefálica, se determinara cuanto es capaz la vitamina C de disminuir el daño oxidativo producido por hipoxia. Evaluaremos la viabilidad celular por el método de exclusión de tinción azul de tripán, MTT y citometría de flujo, determinando niveles de ROS por citometría de flujo, evaluando la expresión de proteínas alteradas por la hipoxia y los transportadores SVCTs mediante Western Blot, RT-PCR e inmunofluorescencia. También estudiaremos un modelo in vivo de ratón GULO knockout con oclusión de la arteria media (OAM), administraremos la vitamina C intravenosa e intranasal y determinaremos si la vitamina C es capaz revertir el daño inducido por la OCM. Para ello evaluaremos la integridad de la BHE (analizando la expresión de proteínas formadoras de las uniones ocluyentes como ocludina y claudina), la presencia de los transportadores de vitamina C, SVCT1 y SVCT2 tanto en las células endoteliales como en los otros componentes celulares del parénquima cerebral (astrocitos y neuronas). Estos resultados permitirán dilucidar la importancia del rol de la vitamina C y sus transportadores de ácido ascórbico (SVCTs) en las células endoteliales microvasculares de cerebro humano bajo un estado de hipoxia tanto en un contexto de modelo in vitro como in vivo asemejando un ACV. En caso de que la vitamina C revierta el daño y la muerte celular inducida por hipoxia estaríamos en presencia de un posible blanco terapéutico para el tratamiento de daño cerebral provocado por altos niveles de estrés oxidativo en un ACV. | es |
| dc.description.campus | Concepción | es |
| dc.description.departamento | Departamento Bioquímica Clínica e Inmunología | es |
| dc.description.facultad | Facultad de Farmacia | es |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.udec.cl/handle/11594/14350 | |
| dc.language.iso | es | es |
| dc.publisher | Universidad de Concepción | es |
| dc.rights | CC BY-NC-ND 4.0 DEED Attribution-NonCommercial-NoDerivs 4.0 International | en |
| dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | |
| dc.subject | Vitamina C | es |
| dc.subject | Hipoxia | es |
| dc.subject | Accidente cerebrovascular | es |
| dc.subject | Isquemia | es |
| dc.title | Efecto de la vitamina C en modelo de hipoxia in vitro con células endoteliales microvasculares de cerebro humano y en modelo de accidente cerebrovascular isquemico in vivo con ratones gulo knockout. | es |
| dc.type | Thesis | en |