Caracterización de la expresión de proteínas pertenecientes a la familia de eph/efrinas de tipo a en el techo diencefálico de embriones de gallus gallus.
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Date
2022
Authors
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Publisher
Universidad de Concepción
Abstract
Una fase crítica del desarrollo temprano del sistema nervioso es el establecimiento de conexiones adecuadas entre neuronas y sus células objetivo. La formación de estas "redes" está controlada por la capacidad del axón para percibir e integrar diversas señales del medio. En animales bilaterales, la línea media es un punto de decisión, en el que axones pueden decidir si cruzar o no, en respuesta a moléculas que actúan como señales de guía. La comisura posterior (CP) es un tracto axonal situado en la placa del techo diencefálico (PTD). Análisis de hibridación “in situ” mostraron que EphA7, un receptor de efrina, se expresa en la PTD, y su inhibición afecta el desarrollo de esta estructura, incluyendo la guía axonal en la CP. La familia Eph/efrina está compuesta por varios miembros que suelen actuar en grupo. Nos propusimos determinar la expresión transcriptómica y proteica de Eph/efrina tipo A durante el desarrollo de la PTD. La expresión del ARNm de Eph/efrina se analizó mediante análisis bioinformático de los datos obtenidos por ARNseq de la PTD (4-7 días de desarrollo de embriones de pollo) y validado por RT-qPCR. La expresión de proteínas se analizó mediante ensayos de western blot (WB) con anticuerpos contra las moléculas Eph/efrina y mediante inmunohistoquímica (IHC) en corte. El análisis mostró la expresión diferencial del ARNm de Eph/efrina, validada por RT-qPCR. El ensayo WB y la IHC mostraron la expresión de varios miembros en la PTD. Nuestros resultados sugieren que las moléculas Eph/efrina se expresan en la PTD, permitiendo el correcto desarrollo de esta región.
Description
Tesis presentada para optar al título de Bioquímico/a.
Keywords
Proteínas, Axones, Inmunohistoquímica, Desarrollo embrionario