Desarrollo de un prototipo de plataforma de evaluación de moléculas con actividad potencial frente al cáncer de próstata resistente a la castración y resistente a la abiraterona.
| dc.contributor.advisor | González Chavarría, Iván Antonio | es |
| dc.contributor.author | Rivas Morales, Yerko Ignacio | es |
| dc.date.accessioned | 2024-11-28T12:41:32Z | |
| dc.date.available | 2024-11-28T12:41:32Z | |
| dc.date.issued | 2024 | |
| dc.description | Tesis presentada para optar al grado académico de Magíster en Biotecnología Molecular | es |
| dc.description.abstract | El cáncer es una de las principales causas de muerte en el mundo. En Chile, el cáncer de próstata (CaP) es la neoplasia maligna más prevalente y con mayor mortalidad en hombres, y el costo de tratamiento asociado a esta patología es elevado, lo que la convierte en un problema de salud pública. El tratamiento principal para el cáncer de próstata avanzado es la terapia hormonal o terapia de privación de andrógenos (ADT). Sin embargo, un porcentaje significativo de pacientes que recibe ADT desarrolla resistencia, evolucionando a cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC). La alternativa terapéutica de última línea para el CRPC es la Abiraterona, un inhibidor selectivo de la enzima esteroidogénica CYP17A1, pero un tercio de los pacientes tratados con este fármaco también desarrollan resistencia, reduciendo su eficacia y limitando la sobrevida. Por lo tanto, es esencial encontrar nuevas estrategias y moléculas para tratar el CRPC resistente a Abiraterona. La evidencia científica actual indica que no existen herramientas celulares y moleculares comerciales o metodologías estandarizadas para evaluar compuestos con potencial terapéutico contra el CRPC resistente a la Abiraterona. En esta tesis, desarrollamos un prototipo de plataforma para la identificación de compuestos y/o moléculas contra el CRPC resistente a la Abiraterona mediante la generación de dos modelos celulares resistentes y la estandarización de una metodología para evaluar la actividad citotóxica o citostática de dichos compuestos. Los modelos celulares de CRPC resistente a la Abiraterona fueron generados mediante el tratamiento crónico de células de CRPC 22RV1 y C4-2B con concentraciones crecientes del fármaco. La estandarización de la metodología de evaluación de compuestos se realizó comparando la información obtenida y las limitaciones metodológicas de los métodos de cristal violeta y el análisis de proliferación y muerte en tiempo real. Nuestros resultados muestran que es posible generar dos modelos de CRPC resistente a la Abiraterona (AbiR), diferenciados fenotípicamente por la sobreexpresión de los marcadores de resistencia a ADT y Abiraterona: AR, CYP17A1, 17β-HSD y PSA, en comparación con las células parentales (wt). Los modelos de CRPC resistentes a la Abiraterona fueron validados por un aumento significativo en la resistencia al fármaco, con un porcentaje de resistencia mayor al 20%. Además, el análisis de proliferación y muerte en tiempo real presentó múltiples ventajas en términos de cantidad de información, precisión, y tiempos, en comparación con el método de cristal violeta. Se evaluaron 5 compuestos con actividad potencial frente al CRPC resistente a la Abiraterona utilizando un sistema semiautomatizado de ensayos de citotoxicidad mediante tratamientos con una plataforma robótica y análisis de proliferación y muerte en tiempo real. Esto permitió identificar actividad diferencial de estos 5 compuestos en los modelos de CRPC AbiR en comparación con las células CRPC wt. | es |
| dc.description.abstract | Cancer is one of the leading causes of death worldwide. In Chile, prostate cancer (CaP) is the most prevalent and the most lethal malignant neoplasm in men, and the cost of treatment associated with this condition is high, making it a public health issue. The main treatment for advanced prostate cancer is hormonal therapy or androgen deprivation therapy (ADT). However, a significant percentage of patients receiving ADT develop resistance, leading to castration-resistant prostate cancer (CRPC). The last-line therapeutic option for CRPC is Abiraterone, a selective inhibitor of the steroidogenic enzyme CYP17A1, but about one-third of patients treated with this drug also develop resistance, reducing its effectiveness and limiting survival. Therefore, it is essential to find new strategies and molecules to treat Abiraterone-resistant CRPC. Current scientific evidence indicates that there are no commercial cellular and molecular tools or standardized methodologies available for evaluating compounds with potential therapeutic action against Abiraterone-resistant CRPC. In this thesis, we developed a prototype platform for identifying compounds and/or molecules against Abiraterone-resistant CRPC by generating two resistant cellular models and standardizing a methodology for evaluating the cytotoxic or cytostatic activity of these compounds. The cellular models of Abiraterone-resistant CRPC were generated through chronic treatment of CRPC 22RV1 and C4-2B cells with increasing concentrations of the drug. The standardization of the compound evaluation methodology was performed by comparing the information provided and the methodological limitations of the crystal violet method and real-time proliferation and cell death analysis. Our results show that it is possible to generate two models of Abiraterone resistant CRPC (AbiR), phenotypically differentiated by the overexpression of resistance markers to ADT and Abiraterone: AR, CYP17A1, 17β-HSD, and PSA, compared to the parental (wt) cells. The Abiraterone-resistant CRPC models were validated by a significant increase in drug resistance, with a resistance percentage higher than 20%. Furthermore, the real-time proliferation and cell death analysis showed multiple advantages in terms of the amount of information, accuracy, and time compared to the crystal violet method. We evaluated 5 compounds with potential activity against Abiraterone-resistant CRPC using a semi-automated cytotoxicity assay system with a robotic platform and real-time proliferation and cell death analysis. This allowed us to identify differential activity of these 5 compounds in the AbiR CRPC models compared to the wt cells. | en |
| dc.description.campus | Concepción | es |
| dc.description.departamento | Departamento de Fisiopatología | es |
| dc.description.facultad | Facultad de Ciencias Biológicas | es |
| dc.description.sponsorship | ANID, FONDECYT REGULAR N° 1231911 | es |
| dc.identifier.doi | https://doi.org/10.29393/TMUdeC-153RY1DP153 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.udec.cl/handle/11594/11235 | |
| dc.language.iso | es | es |
| dc.publisher | Universidad de Concepción | es |
| dc.rights | CC BY-NC-ND 4.0 DEED Attribution-NonCommercial-NoDerivs 4.0 International | en |
| dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | |
| dc.subject | Cáncer de próstata | es |
| dc.subject | Oncología experimental | es |
| dc.subject | Investigación biomédica | es |
| dc.title | Desarrollo de un prototipo de plataforma de evaluación de moléculas con actividad potencial frente al cáncer de próstata resistente a la castración y resistente a la abiraterona. | es |
| dc.type | Thesis | en |