Inducción de la fase G0/G1 del ciclo celular en cultivo de fibroblastos de piel de gatos domésticos (Felis silvestris catus) y Guiñas (Leopardus guigna).
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Date
2017
Authors
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Publisher
Universidad de Concepción
Abstract
La sincronización del ciclo celular de las células donantes juega un papel crucial
en la transferencia nuclear somática (SCNT) y en el desarrollo de embriones
clonados. En este estudio evaluamos el efecto de privación de suero (SS) e
inhibición por contacto (CO), para la inducción de la quiescencia, y su efecto en la
viabilidad celular de fibroblastos de piel de gato doméstico y guiña. Ambos
tratamientos se evaluaron a los días 1, 3 y 5 de confluencia y células en
crecimiento (GC) se usaron como grupo control. El análisis por citometría de flujo
reveló que en los fibroblastos de gato doméstico, SS y CO aumentaron la cantidad
de células en G0/G1 en comparación con GC. Además, sólo SS por 3 y 5 días y
CO por 1 y 3 días aumentaron significativamente la proporción de células en
G0/G1 en fibroblastos de piel de guiña. El análisis de viabilidad celular mostró una
disminución significativa (p < 0,05) en las células que fueron sometidas a 5 días de
SS en comparación a GC para ambas especies. El análisis de la expresión génica,
no encontró diferencias en la ración BAX/ BCL2 entre SS, CO y GC en el gato
doméstico. Sin embargo, en las células de guiña, la relación BAX/ BCL2 fue mayor
en CO después de 3 días que en SS (P <0,05). En conclusión, CO después de 3
días tienen un efecto negativo en los fibroblastos de piel de guiña, posiblemente
relacionados con una alta incidencia de apoptosis. Por esto, se sugiere SS durante
3 días para la sincronización del ciclo celular en guiñas. Estos resultados podrían
ser relevantes para la producción de embriones de guiña por SCNT.
Description
Tesis presentada para optar al título de Médico Veterinario.
Keywords
Animales domésticos, Gatos - Chile, Gatos - Enfermedades, Apoptosis.