Utilización de antibióticos como factor de estrés para el ingreso de H. pylori J99 en C. albicans ATCC10231.
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Date
2019
Authors
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Publisher
Universidad de Concepción
Abstract
H. pylori es una bacteria patógena que afecta al 50% de la población mundial y
se encuentra ampliamente asociada a enfermedades de alto impacto como
cáncer gástrico y úlcera gastroduodenal. Actualmente se utiliza como
tratamiento de erradicación la terapia clásica de primera línea, que consta de
dos antibióticos (claritromicina y amoxicilina) junto con un inhibidor de la bomba
de protones (generalmente omeprazol). Sin embargo, este tratamiento ha
perdido efectividad con el tiempo debido a la aparición de cepas resistentes a
claritromicina y metronidazol, lo cual la ha convertido en una bacteria de difícil
erradicación.
Por otro lado, se han reportado in vivo interacciones endosimbióticas de H.
pylori en C. albicans (levadura de la microbiota normal), donde H. pylori se
encuentra al interior de C. albicans, evitando con esto la acción de los
antibióticos sobre la bacteria. Los factores que promueven este comportamiento
aun no son del todo entendidos, sin embargo, se ha sugerido que el estrés
sobre la bacteria podría gatillar los mecanismos asociados al ingreso, siendo
estos aún desconocidos. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de claritromicina y
amoxicilina (tratamiento de primera línea) como factor de estrés sobre H. pylori,
en promover su ingreso a C. albicans.
Mediante la determinación de curvas de crecimiento, tanto para H. pylori como
para C. albicans, y la concentración mínima inhibitoria (CMI) de claritromicina y
amoxicilina sobre H. pylori, se obtuvieron las condiciones para realizar cocultivos en condiciones sub-inhibitorias de cada antibiótico (¼ de la CMI
experimental) por separado en caldo Brucella con 10% suero fetal bovino. La
internalización de H. pylori en C. albicans fue evaluada utilizando microscopía
de luz. Además, un subcultivo de C. albicans se aisló en agar Sabouraud y fue
estudiada la presencia del gen ARNr 16S de H. pylori por PCR.
Se encontraron levaduras que tenían solo 1 cuerpo parecido a bacteria al
interior de estructuras membranosas internas (similares a vacuola). Este
ingreso se registró en todos los experimentos realizados, sin embargo, un
aumento significativo del 50% es detectado únicamente al realizar el co-cultivo
en presencia de amoxicilina a las 24 h. Se confirmo la presencia de H. pylori por
detección por PCR.
Amoxicilina contribuye como factor de estrés en el ingreso de H. pylori a C.
albicans.
Description
Tesis presentada para optar al grado de Magíster en Ciencias, mención en Microbiología.
Keywords
Helicobacter pylori, Electroforesis, Antibióticos, Claritromicina, Efecto de los Antibióticos, BIENESTAR Y SALUD