Análisis de la localización subcelular de XtRic-8A y de su participación en la polarización celular en embriones de X. tropicalis.
Loading...
Date
2012
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad de Concepción.
Abstract
Inicialmente Ric-8 fue identificada promoviendo la vía de liberación de vesículas
sinápticas en C.elegans y participando durante la división asimétrica en la
embriogénesis de Drosophila. Por otro lado, en nuestro laboratorio hemos observado
que ensayos de pérdida de función de Ric-8A en X. tropicalis, generan un fenotipo
con células que presentan un retardo en la división celular y defectos en la
pigmentación en las primeras etapas del desarrollo embrionario, un fenotipo que
previamente fue descrito en embriones que presentan problemas en polarización
celular.
Por esta razón nos hemos planteado como hipótesis para este trabajo de tesis, que
“XtRic-8A participa en polarización celular, etapa previa a procesos como la división
asimétrica y migración celular, eventos importantes durante el desarrollo embrionario
de un organismo.” Por lo tanto, con el objetivo de entender el rol que podría estar
cumpliendo Ric-8 durante la división y polarización celular, en este trabajo de tesis
se analizó la localización subcelular de XtRic-8A durante el ciclo celular en células
HeLa y en cortes de embriones tempranos en X. tropicalis. Nuestros resultados
indican que XtRic-8A se localiza en la membrana citoplasmática, en la región
perinuclear, y en el citosol durante la interfase, mientras que en metafase se localiza
alrededor de la placa metafásica.
Por otra parte, ensayos de pérdida de función, utilizando un morfolino contra XtRic-
8A, muestran un cambio en la distribución de proteínas cuya localización se
encuentra polarizada durante etapas tempranas de la embriogénesis. Este resultado
sugiere que XtRic-8A podría ser requerido durante eventos de polarización celular,
paso importante durante procesos como la división celular asimétrica y migración
celular. Finalmente, este fenotipo pudo ser rescatado al sobreexpresar la subunidad
XtGαi, proteína que participa en la división asimétrica, sugiriéndonos que ambas
proteínas podrían estar participando juntas durante polarización celular. Por último,
ensayos de co-inmunoprecipitación y docking demostraron que ambas proteínas son
capaces de interaccionar, localizándose en la región basolateral de las células del
animal cap del embrión de X. tropicalis.
Description
Tesis para optar al grado de Magister en Bioquímica y Bioinformática
Keywords
Embriología, División Celular, Biología Molecular