Facultad de Ciencias Biológicas
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Browsing Facultad de Ciencias Biológicas by Subject "Ácido glutámico"
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Item Participación de la liberación vesicular de ATP y glutamato durante la neurulación y sus implicaciones en la inducción de defectos del tubo neural.(Universidad de Concepción, 2025) Fuentes Cifuentes, Nicolás Antonio; Castro Maldonado, Patricio AlejandroLa neurulación es un proceso embrionario que involucra la diferenciación de una región del ectodermo hacia células neuroectodermales, a través de eventos morfogénicos, proliferativos y migratorios. Esta etapa concluye con la formación de una estructura tubular denominada tubo neural, de la cual se origina todo el sistema nervioso central. Los eventos celulares involucrados en la formación del tubo neural están dirigidos por distintas vías de señalización paracrinas, como la vía Wingless-int (Wnt), factores de crecimiento de fibroblastos (FGFs), proteína morfogénica ósea (BMP), Noggin y Chordin, las cuales modulan procesos como la proliferación, diferenciación y migración de los precursores neurales. La evidencia sugiere que la señalización purinérgica y glutamatérgica están involucradas en el proceso de formación del tubo neural, con el receptor purinérgico P2X4 y glutamatérgico NMDA como participantes relevantes durante la neurulación. Complementariamente, se han descrito mecanismos de liberación paracrina de ATP que activan receptores purinérgicos durante la neurulación, identificándose la participación de la conexina 46 como parte de un posible mecanismo mediado por hemicanales durante la formación del tubo neural. Sin embargo, se desconoce si durante este proceso existe un mecanismo de liberación de ATP y glutamato dependiente de vesículas, similar al utilizado en el sistema nervioso central. Por lo anterior, el presente trabajo tiene por objetivo evaluar la presencia de un mecanismo de liberación de ATP y glutamato dependiente de vesículas, así como su participación en el cierre del tubo neural. En este trabajo, se utilizaron embriones de Xenopus laevis en proceso de neurulación como modelo de estudio. Se recolectaron embriones en estadio de neurulación temprana (E12,5), intermedia (E14) y tardía (E20), con el fin de evaluar la expresión de transcritos y proteínas relevantes para la liberación vesicular de ATP y glutamato, mediante los métodos de RT-qPCR y Western blot, respectivamente. Posteriormente, se evaluó el efecto de bafilomicina A1, un inhibidor de la V-ATPasa que impide el llenado vesicular, sobre la inducción de defectos del tubo neural, cuyos resultados fueron congruentes con los niveles extracelulares de ATP y glutamato en la etapa final de la neurulación. Los resultados de este trabajo evidencian la presencia de transcritos y proteínas asociadas al llenado y liberación vesicular de ATP y glutamato, así como un retraso en el cierre del tubo neural acompañado de una disminución en la liberación de estos neurotransmisores como consecuencia del tratamiento con bafilomicina A1 durante la neurulación. Estos hallazgos sugieren que la liberación de ATP y glutamato asociada a vesículas se encuentra activa durante la neurulación y que la inhibición de este mecanismo mediante bafilomicina A1 induce defectos del tubo neural.