Aislamiento y caracterización de proteínas del plasma seminal de chivo (Capra hircus) por cromatografía de afinidad a fibronectina.
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Date
2011
Authors
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Publisher
Universidad de Concepción.
Abstract
Con el propósito de aislar y caracterizar fracciones proteicas del plasma seminal
(PS) de chivo, eyaculados de 5 chivos sexualmente maduros (mayor de 6 meses)
fueron colectados por vagina artificial. El plasma seminal fue centrifugado,
posteriormente precipitado con etanol frio y nuevamente centrifugado. El pellet
obtenido de la última centrifugación, fue resuspendido en buffer fosfato salino
(PBS) y transferido a una columna de Gelatina-Sepharosa para capturar proteínas
que presenten dominio de Fibronectina tipo ll. La columna fue lavada con PBS y
eluída con una solución de urea. Las fracciones proteicas recogidas fueron
concentradas y luego cuantificadas por el método de Bradford. Para determinar el
perfil proteico y la masa molecular fue realizada una electroforesis en geles de
poliacrilamida (SDS-PAGE). La cromatografía muestra que se obtuvieron 2
fracciones de proteínas, las que se denominaron A y B. La fracción B reveló la
presencia de 4 bandas proteicas, de diferente peso molecular, correspondiendo a
las proteínas con dominio de fibronectina tipo II, con masas moleculares de 14
kDa, 15 kDa, 20 kDa y 22 kDa, que representaron un 8,1% del total de proteínas
del PS. Las 4 proteínas con dominio de fibronectina tipo II aisladas, podrían
utilizarse para estudios adicionales en biología y tecnología espermática
Description
Memoria para optar al Título de Médico Veterinario.
Keywords
Chivos, Caprinos, Semen, Proteínas seminales.