Estudio de la función de RIC-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración celular.
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Date
2021
Authors
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Publisher
Universidad de Concepción
Abstract
La migración celular, consistente en la traslación de las células o porciones de
ellas de un lugar a otro, es un proceso altamente complejo que depende de la correcta
coordinación de la extensión de la membrana plasmática, de la adhesión dinámica de
la célula al sustrato y de la contracción de las fibras de actina – miosina, eventos que
se basan en la remodelación del citoesqueleto.
Estudios realizados en nuestro laboratorio y por otros grupos de investigación,
vinculan la actividad de Ric-8A, una proteína con actividad GEF sobre diferentes
subunidades Gα, con el proceso de migración celular. Ejemplo claro de ello es que el
silenciamiento de Ric-8A en embriones de Xenopus tropicalis inhibe la migración de
células de la cresta neural craneal, reduce el número de adhesiones focales
establecidas, altera la polaridad celular y disminuye el tamaño de las protrusiones
generadas. A pesar de la evidencia existente de los defectos celulares presentes en
ausencia de Ric-8A, no se ha descrito en totalidad el mecanismo molecular mediante
el cual esta proteína regula la migración y otros procesos celulares ligados a la
estructuración del citoesqueleto. Es por ello, que en este trabajo se estudió la función
de Ric-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración. A través
del uso de ensayos de cierre de herida se determinó que la alteración de los niveles
de expresión de Ric-8A provoca un aumento en la velocidad de migración de células
NIH3T3 sin alterar la direccionalidad del movimiento. Además, se encontró que Ric-8A
se concentra en los bordes de las protrusiones de diferentes tipos de células en
migración. Al analizar el efecto de la deficiencia de Ric-8A en la adhesión célula -
sustrato, no se encontró un efecto evidente sobre el número ni tamaño de adhesiones
focales; sin embargo, se observó que las células carentes de Ric-8A se adhieren más
rápido a fibronectina en comparación a las células control. En último lugar se procedió
a realizar un análisis de espectrometría de masas para identificar a las proteínas que
forma complejos con Ric-8A, encontrándose entre ellas proteínas Gα y, de forma
interesante, a α-tubulina y vinculina. Estos resultados en conjunto sugieren que Ric8A controla la migración celular a través de la regulación de las vías de señalización
dependientes de GTPasas y de su acción directa sobre proteínas componentes de las
estructuras celulares que permiten la motilidad.
Description
Tesis presentada para optar al grado de Doctor en Ciencias Biológicas, área Biología Celular y Molecular.
Keywords
Movimiento Celular, Citoesqueleto de Actina, Polaridad Celular