Tesis Doctorado

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Browsing Tesis Doctorado by Author "Álvarez Martínez-Conde, Claudia Isabel"

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    Regulación transcripcional de NUAK1 por SALL2 frente a estrés metabólico.
    (Universidad de Concepción., 2023) Álvarez Martínez-Conde, Claudia Isabel; Pincheira Barrera, Roxana; Castro Alma, Ariel
    El estrés metabólico en cáncer es un paso crítico para la migración, invasión y metástasis. NUAK1, un miembro de la familia de quinasas relacionadas a AMPK (ARKs), se encuentra desregulado en algunos tipos de cáncer. Su sobreexpresión promueve migración, metástasis y supervivencia celular frente a distintos contex-tos, incluyendo estrés metabólico. Datos de nuestro laboratorio muestran que NUAK1 es inducido transcripcionalmente frente a la carencia de glucosa; sin embar-go, se desconocen los mecanismos que participan en esta respuesta. Se ha pro-puesto que SALL2, un factor de transcripción con roles duales en el cáncer podría estar involucrado. Aunque SALL2 generalmente actúa como un supresor tumoral, en condiciones de estrés metabólico su expresión aumenta y contribuye a la supervi-vencia en células MEF; sin embargo, el mecanismo mediante el cual SALL2 ejerce este rol no ha sido reportado. Para investigar la relación entre NUAK1 y SALL2, se realizaron análisis bioinformáticos utilizando bases de datos como miPanda y R2, los cuales mostraron una correlación positiva entre los niveles de SALL2 y NUAK1 en varios tejidos. De acuerdo con esos análisis, encontramos una dependencia de SALL2 para el incremento en la expresión de NUAK1 frente a estrés metabólico por carencia de glucosa. Con el fin de determinar si NUAK1 es un blanco directo de SALL2, se analizó el promotor de NUAK1 humano y Nuak1 de ratón, en los cuales se encontraron sitios consenso de unión a SALL2 conservados entre ambas especies. Ensayos de gen reportero de luciferasa demostraron que la ganancia de función de SALL2 incrementa la actividad del promotor Nuak1, mientras que estudios de inmu-noprecipitación de cromatina (ChIP) demostraron que SALL2 se une al promotor NUAK1. Al comprobar el rol pro-supervivencia de SALL2 ante estrés metabólico en diferentes modelos, se encontraron tendencias controversiales. Solo se observó el incremento en la supervivencia celular dependiente de SALL2 en modelos de pérdida de función (silenciamiento), y la tendencia fue similar a los datos previos usando células MEF silvestres y deficientes de Sall2. Más aún, nuestros estudios sugieren que existe una dependencia de NUAK1 para el rol pro-supervivencia de SALL2. De forma interesante, la inhibición de NUAK1 en condiciones de alta glucosa, induce la formación de vacuolas que se corresponden con el fenotipo de un tipo de muerte ce-lular conocida como methuosis, las cuales son más abundantes en células shCtrl respecto a las silenciadas (shSall2). Estos datos se condicen con observaciones pre-vias del laboratorio en células de cáncer de colon, asociándose SALL2 con la gene-ración de methuosis. En conjunto, nuestros datos sugieren a NUAK1 como un blanco transcripcional de SALL2 asociado a la supervivencia celular frente a estrés metabólico por carencia de glucosa. Dilucidar los mecanismos normales de regulación transcripcional de NUAK1 es esencial para comprender su desregulación en cáncer.
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