Tesis Magíster
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Browsing Tesis Magíster by Subject "Acción CLIMÁTICA"
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Item Efecto del tratamiento de las aguas servidas del Gran Concepción, en la carga de Enterobacterales resistentes a cefalosporinas de tercera generación y/o carbapenémicos, y de genes codificantes de β-lactamasas de espectro extendido y/o carbapenemasas.(Universidad de Concepción, 2025) Ilabaca Carrasco, Franco Amilcar; González Rocha, Gerardo Enrique; Bello Toledo, Helia MagalyLa resistencia a cefalosporinas de tercera generación (C3G), y a carbapenémicos mediada por β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) y, por carbapenemasas respectivamente, constituye un creciente problema a nivel mundial, por ser mecanismos de resistencia de prioridad critica, presentes principalmente, aunque no exclusivamente en Enterobacterales. La resistencia a tales antibacterianos se ha estudiado tradicionalmente durante décadas, desde una perspectiva antropocéntrica. Sin embargo, las evidencias más recientes indican que la fauna doméstica y silvestre, la flora, así como otros sustratos naturales, también se han perjudicado por dicho problema, por lo cual, se ha incentivado su estudio desde el enfoque “One health”. Las plantas de tratamiento de aguas servidas (PTAS) constituyen importantes reservorios de múltiples contaminantes, en las cuales se han pesquisado por varios autores a nivel internacional, bacterias resistentes productoras de BLEE y carbapenemasas, así como genes codificantes para tales enzimas, directamente en muestras de aguas servidas (AS) y de lodos. No obstante, en Chile existen escasos reportes sobre resistencia a antibióticos en AS, por lo que el objetivo de esta tesis fue; evaluar diferencias en las cargas de Enterobacterales resistentes a C3G y/o carbapenémicos y en la carga de genes que codifican BLEE y/o carbapenemasas, por acción del tratamiento de las AS del Gran Concepción. Se obtuvieron 8 muestras de AS, (4 de afluente (AF) y 4 de efluente (EF)), entre Enero y Julio de 2022, las que se sembraron en agar R2A, MacConkey (MCC), MacConkey suplementado con ceftriaxona (MCC+C) y MacConkey suplementado con meropenem (MCC+M), empleando diluciones seriadas para estimar recuentos bacterianos. Se aislaron un total de 205 Bacilos Gram negativos (BGN), de los cuales 50 correspondieron a Enterobacterales (48 de AF y 2 EF). A estos últimos, se les determinó la susceptibilidad a diferentes antibióticos mediante antibiograma, la detección fenotípica y genotípica de BLEE y carbapenemasas. Además, directamente desde las mismas muestras de AF y EF, se llevó a cabo detección genotípica de dichas enzimas. Los recuentos bacterianos se redujeron significativamente en todas las muestras de AF en comparación a las de EF, y en todos los medios de cultivo empleados, sobre todo, los recuentos totales, que disminuyeron entre 5 a 6 logaritmos. De los Enterobacterales aislados, las especies más frecuentes fueron E. coli (16/50), K. pneumoniae complex (12/50), y K. oxytoca complex (6/50). En las cepas de Enterobacterales obtenidos de AF (48/50), 7 cepas demostraron índices MAR > 0,5, de las cuales; dos destacaron por poseer MAR de 0,81 y 0,75, presentando resistencia a 13 y 12 antibióticos de 16 probados. Otras tres presentaron un MAR de 0,63, (resistentes a 10/16 antibacterianos). Mientras que las dos restantes poseyeron un MAR de 0,56 (resistentes a 10/16 antibacterianos). Además, 8 cepas presentaron perfiles MDR. En la detección fenotípica de BLEE se obtuvo positividad en 23/48 cepas de AF y 1/2 cepas de EF, mientras que 3/48 de AF resultaron positivas para detección fenotípica de carbapenemasas. En relación con los genes codificantes de BLEE, estos se detectaron en 23/48 cepas de AF y en 1/2 de EF, siendo blaCTX-M-1-like el prevalente entre los 50 Enterobacterales indagados. Luego, en 3/48 cepas de AF se detectó el gen codificante de carbapenemasas blaKPC-2. Mientras que, en las cepas de EF, no se detectaron genes codificantes de carbapenemasas. Por otra parte, directo de las AS, se detectaron los genes blaCTX-M-1-like, blaKPC, y blaOXA-48-like en AF y EF, mientras que blaVIM se encontró solo en las muestras de AF. La reducción de los recuentos bacterianos demostró la eficacia del tratamiento de AS del Gran Concepción sobre la vida bacteriana, pero no así sobre los genes codificantes de BLEE y carbapenemasas disueltos en las AS. Los Enterobacterales estudiados representaron un bajo porcentaje (27%) de los 205 BGN totales, por lo que, los restantes 155 (73%) organismos podrían poseer una participación más importante en la mantención y diseminación de genes de resistencia antibiótica (GRAs) en AS. Las BLEE fueron las enzimas más prevalentes en las cepas estudiadas, siendo blaCTX-M-1-like el gen codificante más frecuente encontrado en estas, lo que conecta con el hallazgo de este en todas las muestras de AS. Por lo tanto, la pesquisa de los variados genes codificantes de BLEE y de carbapenemasas, tanto en los Enterobacterales estudiados, como directamente desde las AS, demuestra la capacidad de estas últimas de almacenar y transmitir GRAs de alto impacto en salud pública.Item Evaluación comparativa de electrodos de óxido de grafeno y óxido de grafeno reducido como soportes en la formación de biopelículas electrogénicas de Shewanella oneidensis MR-1.(Universidad de Concepción, 2025) Ramírez Ramírez, Carla Estefanía; Urrutia Briones, HomeroClimate change and water scarcity represent significant threats to environmental sustainability on a global scale. Bioelectrochemical systems (BES) are a promising and eco-friendly solution for both wastewater treatment and clean energy generation, and even for both in the same process. However, their adoption has been limited by high costs, long startup periods, and low energy efficiency. Over the past decade, optimizing electrode materials has emerged as a key strategy to improve the performance of BES. Graphene-based electrodes, particularly graphene oxide (GO) and reduced graphene oxide (rGO), have garnered significant interest due to their biocompatibility, high conductivity, and superior mechanical properties. Nevertheless, the literature presents conflicting results regarding the effect of graphene on bacteria; some studies suggest antibacterial properties, while others highlight increased biofilm adhesion and electron transfer in microorganisms cultivated on this material. To address this uncertainty, this research conducted a comparative study of GO and rGO electrodes using pure cultures of Shewanella oneidensis MR-1, focusing on the surface effect on biofilm formation. Biofilms of S. oneidensis MR-1 were cultivated under controlled anaerobic conditions, and their composition was characterized, evaluating the abundance of proteins, carbohydrates, and extracellular DNA, as well as viability through LIVE/DEAD BacLight staining. Furthermore, cyclic voltammetry (CV) was employed to explore the redox behavior of the biofilms and the differences in electron transfer mechanisms. The results showed that S. oneidensis MR-1 biofilms on GO electrodes exhibited higher cell viability compared to those developed on rGO. However, this difference tended to diminish over time, suggesting that the antibacterial effect of rGO is transient and weakens as the biofilm matures. A protein/carbohydrate (P/C) ratio of 1.01 ± 0.22 was recorded for the GO biofilms and 1.75 ± 0.20 for the rGO biofilms. Finally, the VC analysis revealed distinct redox behaviors between the two biofilms, indicated by differences in redox peaks. This may be attributed to the higher amount of oxygenated functionalities in GO compared to rGO. peces (p=0,985). Las cepas analizadas presentaron baja susceptibilidad a antibióticos betalactámicos, que podría estar asociada a la producción de betalactamasas. La diversidad de estas enzimas depende del género bacteriano y no de la especie hospedera, lo que sugiere una baja presión de selección ambiental en este ecosistema extremo.