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Acinetobacter Baumannii y Pseudomonas Aeruginosa resistentes a colistin, problemas en el diagnostico clínico y nuevos métodos para el estudio de susceptibilidad.
(Universidad de Concepción, 2022) Seitz Osses, Francisco Eduardo; Opazo Capurro, Andrés Felipe
Debido al excesivo y mal uso de los antibióticos para tratar infecciones, causadas por bacterias multidrogo-resistentes (MDR), los reportes de bacterias multiresistentes a nivel global tales como Acinetobacter baumannii y Pseudomonas aeruginosa también ha ido en aumento, Una estimación reciente sugiere que el continuo aumento de las infecciones por microorganismos resistentes a los antimicrobianos, siguiendo las tendencias actuales, provocará 10 millones de muertes por año en 2050, es decir, será la primera causa de muerte a nivel mundial, incluso por sobre la diabetes y el cáncer. Debido a lo anterior, es que el objetivo de este trabajo fue describir los mecanismos de resistencia a colistín, tanto intrínsecos como extrínsecos (adquiridos) en las bacterias antes mencionadas, además se investigó sobre los nuevos métodos de susceptibilidad a colistín en los laboratorios clínicos, los cuales están orientados a reemplazar el método de microdilución en caldo (BMD), esta es la técnica de referencia autorizada por el Clinical & Laboratory Standards Institute (CSLI) y European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST), dónde posee una serie de desventajas, tales como el alto consumo de tiempo para el operador y la demora en la obtención de resultados.
Análisis de la NETosis en pacientes que padecieron COVID-19 y su asociación con alteraciones del perfil del metabolismo glucídico.
(Universidad de Concepción, 2021) Cabrera García, Camilo Daniel; Nova Lamperti, Estefanía Andrea; Labarca Trucios, Gonzalo Patricio
La enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) es una infección viral causada por el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo 2 (SARS-CoV-2) clasificada como la pandemia el año 2020. Estudios recientes han demostrado que pacientes COVID-19 con peor pronóstico presentan una alta neutrofilia y la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETosis). Además, alteraciones en el metabolismo glucídico se han descrito como factores de riesgo de severidad en COVID-19 y como potencial secuela post infección. La regulación del metabolismo glucídico es clave en la activación del neutrófilo, sin embargo, no está claro si estas alteraciones pueden afectar la función del neutrófilo post COVID-19. El objetivo de este trabajo fue analizar la NETosis de pacientes que padecieron COVID-19 y su relación con alteraciones del metabolismo glucídico. Parámetros del metabolismo glucídico como glicemia, insulina, HOMA-IR y la NETosis fueron medidos en 60 pacientes que cursaron con COVID-19. Los resultados revelaron que 19 pacientes tenían alteraciones metabólicas previo al COVID-19 y de los 41 pacientes que no presentaron está comorbilidad, 26 pacientes desarrollaron insulinorresistencia (IR) 6 meses posterior al COVID-19. Al analizar la NETosis, se observó que los pacientes que desarrollaron IR a los 6 meses presentaron un aumento significativo de NETosis basal con respecto a los 2 grupos. Además, se observó un aumento de la NETosis de neutrófilos sanos expuestos al plasma de pacientes COVID-19 con IR respecto a pacientes sin IR, lo que se correlacionó positivamente con los niveles de insulina en el plasma. En conclusión, existe un aumento de incidencia IR 6 meses-post-COVID-19 en pacientes sin alteraciones previas, los que además presentaron un aumento de NETosis vital basal y un aumento en la capacidad de inducir la formación de NETs en neutrófilos sanos.
Análisis de la producción de anticuerpos IgG ANTI-SARS-CoV-2 en pacientes COVID-19 chilenos leves y severos.
(Universidad de Concepción, 2022) Quiroga Sanzana, Romina Andrea; Nova Lamperti, Estefanía Andrea
La investigación sobre la producción de anticuerpos durante la enfermedad por Coronavirus 2019 (COVID-19) ha cobrado importancia debido a su capacidad para potenciar la eliminación viral y el desarrollo de una respuesta de memoria. Recientes publicaciones han evidenciado diferencias en la generación de anticuerpos según la severidad del cuadro infeccioso, sin embargo, el rol de estos aún no está dilucidado. El objetivo de esta investigación fue analizar la respuesta humoral anti-SARS-CoV-2 en una cohorte de 60 pacientes chilenos que cursaron COVID-19 de forma severa, moderada y leves a los 6 y 12 meses post infección. Los niveles de anticuerpos IgM, IgG y neutralizantes (NAbs) se midieron mediante inmunoensayo por quimioluminiscencia (CLIA) y sus niveles fueron relacionados con secuelas pulmonares estructurales, funcionales y alteraciones del metabolismo glucídico. Además, se determinó el porcentaje de células B anti RBD para analizar la respuesta inmune de memoria a nivel celular por citometría de flujo. Los resultados revelaron que 6 meses posterior a la infección, los pacientes con cuadros severos presentaron mayores niveles de IgG que pacientes con cuadros leves, aumento asociado a daño pulmonar estructural y metabolismo glucídico alterado previo a la infección, pero no con disfunción pulmonar. Estas diferencias no se observaron a los 12 meses en los niveles de IgG, pero sí en NAbs. Todos los pacientes presentaron células B anti-RBD, pero éstas no se relacionaron con ningún parámetro analizado. Por lo tanto, la producción de IgG se encuentra relacionada con la severidad en pacientes chilenos, no así la diferenciación a células B anti-RBD. Los resultados demuestran que todos los pacientes generaron una respuesta humoral antígeno específica y que la severidad del cuadro no se asocia con una falla en la capacidad de generar anticuerpos totales o neutralizantes anti-SARS-CoV-2, ni con una falla en la generación de la respuesta de memoria de linfocitos B.
Análisis de la relación entre la disminución de peso y el patrón de expresión proteica de PPARg, UCP1 y Leptina en tejido adiposo blanco, en un modelo murino obeso suplementado con aceite de semilla de Pinus Radiata.
(Universidad de Concepción, 2022) Wernekinck Masquiarán, Felipe Andrés; Durán Sandoval, Daniel Andrés
La obesidad es una enfermedad que se ha convertido en un problema de salud pública en países desarrollados como en países en desarrollo. En la población chilena, las cifras son alarmantes teniendo en cuenta la última Encuesta Nacional de Salud 2016-17 (ENS), en donde se produjo un incremento en la tasa de obesidad con respecto a la última ENS 2009-10. Actualmente, la incidencia de esta enfermedad en la población chilena es de alrededor de un 31.2%, lo cual causa gran preocupación debido a las comorbilidades asociadas a la obesidad. Existen diferentes maneras de afrontar la obesidad, en una primera instancia se opta generalmente por realizar un cambio en el estilo de vida de la persona, llevando a cabo una alimentación saludable y un aumento en la actividad física. Sin embargo, esto no siempre se puede llevar a cabo, por lo cual existen diferentes alternativas, como son los tratamientos farmacológicos, tanto para tratar la obesidad en si como también, las comorbilidades asociadas. En esa misma línea, otra estrategia terapéutica son las quirúrgicas asociadas a la cirugía bariátrica, como son el Bypass Gástrico, la Gastrectomía Vertical y la Banda Gastrica Ajustable, siendo las dos primeras las más realizadas en nuestro país (Maluenda et al., 2012). Dentro de estas alternativas dirigidas al tratamiento de la obesidad existe también la suplementación de comidas con ácidos grasos poliinsaturados V (PUFAs) encontrados en aceites naturales, que han demostrado tener diversos efectos beneficiosos en el contexto de la obesidad. Dentro de estos aceites se encuentra el Aceite de Pinus koraiensis, que contiene alrededor de un 15% de Ácido Pinolénico, al cual se le han atribuido efectos benéficos en el metabolismo lipídico de modelos murinos. Sin embargo, se desconoce el mecanismo molecular por el cual este ácido graso lleva a cabo su acción. En Chile, el aceite de semilla de Pinus radiata posee alto porcentaje de Ácido Pinolénico en comparación a otras pináceas. Estudios han demostrado que la suplementación con este aceite natural en un modelo murino de obesidad inducido por dieta, provoca una disminución en la ganancia de peso e induce un aumento en la expresión génica de PPARγ y UCP1 en tejido adiposo blanco. Así, la presente propuesta plantea demostrar si el tratamiento con este aceite regula la expresión de estas proteínas en un modelo in vitro de tejido adiposo. En este contexto, se propone realizar un estudio proteómico por espectrometría de masa asociado a cromatografía líquida para identificar las proteínas del tejido adiposo involucradas en este proceso. Finalmente, se analizará la correlación entre la expresión de proteínas reguladas por el aceite de semilla de Pinus radiata con la disminución de peso observada in vivo bajo este tratamiento.
Análisis de los métodos de cuantificación de quimioquinas en saliva de pacientes con cáncer oral.
(Universidad de Concepción, 2021) Pérez Bastías, Nicolás Alonso; Nova Lamperti, Estefanía Andrea
El cáncer oral es un tumor maligno que comprende a todos los tejidos de la cavidad bucal, siendo más frecuente el carcinoma de células escamosas (OSCC). La elevada mortalidad del cáncer de boca se debe a que es un cáncer multifactorial que se diagnostica en etapas tardías por lo que es necesario de nuevas alternativas que subsanen esta y otras falencias de los métodos actuales de detección. Es por esto que la opción de biomarcadores relacionados con la detección temprana de cáncer adquiere gran relevancia como herramienta diagnóstica, más aún cuando la matriz de trabajo es la saliva dando un enfoque menos invasivo a comparación con las actuales tomas de muestra para diagnóstico de cáncer oral. En este contexto, el aumento de niveles de proteínas como las quimioquinas ha sido relacionado con el inicio y avance del OSCC, sin embargo, su uso como biomarcadores de esta patología no ha sido demostrado, ni tampoco la metodología requerida para evaluar su potencial rol como biomarcador temprano. Por consiguiente, el objetivo de este estudio es analizar los métodos inmunológicos, moleculares y proteómicos que permitan cuantificar quimioquinas en saliva como potenciales biomarcadores temprano de cáncer oral. Primero se realizó una búsqueda para identificar estudios que hayan medido quimioquinas en saliva de pacientes con cáncer oral y se analizaron los protocolos de toma de muestra y procesamiento de saliva para la detección de quimioquinas. Además, se analizaron dispositivos comerciales patentados para la toma de muestra de saliva. Luego se evaluaron los potenciales métodos de detección y cuantificación de quimioquinas según su principio y en base a sus limitaciones técnicas y costos. Finalmente, se realizó una comparación entre las distintas técnicas analizadas para evaluar las principales ventajas y desventajas. Los resultados del presente estudio lograron definir e identificar a los métodos inmunológicos como la mejor alternativa para la medición de quimioquinas en saliva. Además, los resultados destacan la presencia de la IL-8 como la principal quimioquina reportada hasta la fecha en muestras de saliva de pacientes con cáncer oral.
Análisis de los residuos relevantes en la coordinación con el cofactor Manganeso en la Agmatinase Like protein (ALP).
(Universidad de Concepción, 2024) Fuentes Leyton, Allison Marioth; Uribe Pérez, Elena Amparo
La agmatinase like protein (ALP) es una enzima que se clonó a partir de una librería de genes de cerebro de rata y presenta actividad agmatinasa, hidrolizando la agmatina a putrescina y urea. Esta enzima requiere Mn2+ como cofactor y posee un bajo porcentaje de identidad con las agmatinasas conocidas, no conservando los residuos de coordinación al metal activador. En trabajos previos del laboratorio por la falta de información estructural se realizó un modelo estructural de ALP, en el cual se propusieron 5 posibles residuos que interaccionarían con el cofactor Mn2+. Se generó una mutante triple (N213A/Q215A/D217A) y una mutante doble (E288A/K290A) de estos residuos y ambas mutantes no presentaron actividad enzimática. Esta tesis tiene como objetivo evaluar la participación de cada uno de los residuos de la mutante triple en la actividad y coordinación metálica de ALP. Para ello, se generaron mutantes simples reemplazando cada residuo por alanina a través de mutagénesis sitio dirigida, se purificó parcialmente cada enzima por cromatografía de intercambio aniónico y se analizaron sus parámetros cinéticos. Como resultado, se obtuvo que las tres mutantes simples presentaron valores de Km y Vmáx menores que la enzima silvestre. Para analizar la interacción enzima-Mn2+, se realizaron experimentos de activación enzimática, diálisis, hiperactivación, determinación del contenido metálico y especificidad de la activación con el metal y en todos los resultados las tres mutantes simples no mostraron diferencias con la enzima silvestre. Concluimos que las tres mutaciones simples afectaron el sitio activo de la enzima ya que alteraron sus parámetros cinéticos y postulamos que estos residuos se encuentran próximos al sitio activo. Dado que las mutaciones no alteraron la interacción enzima-Mn2+ concluimos que estos residuos no participan directamente como ligandos coordinantes del metal activador Mn2+.
Análisis del perfil de N6-metiladenosina de ARN mensajeros en microglia infectada con virus de la inmunodeficiencia humana 1.
(Universidad de Concepción, 2024) Badilla Zambrano, Nicolás Antonio; Castro Alma, Ariel Fernando; Toro Ascuy, Daniela
Desde 1981 el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH)/síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) se ha vuelto una problemática humanitaria que ha ido en aumento, transformándose en una de las pandemias más devastadoras a nivel mundial (CDC, 1981). El último informe de ONUSIDA, al cierre del 2022, muestra que 39 millones de personas viven con el virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1), 630.000 personas fallecieron a causa de enfermedades relacionadas con el SIDA, y 1,3 millones de personas contrajeron la infección por VIH-1. Aunque el desarrollo de Terapias Antirretrovirales (TAR) han permitido generar un tratamiento estándar para las personas diagnosticadas con VIH-1 que no estén en una etapa avanzada, mejorando en gran medida la calidad de vida de los pacientes, presenta como gran limitación la incapacidad de poder eliminar el reservorio viral latente (Vargas, 2016). Dentro de los tejidos que se encuentran como reservorios virales está el sistema nervioso central (SNC), y dada la continua replicación viral subclínica crónica puede dar origen a patologías como HAND (del inglés, HIV-associated Neurocognitive disorder ). Aunque la prevalencia de HAND no está estudiada a fondo, estudios han señalado que la mitad de los portadores de VIH con marcadores clínicos controlados presentan la patología (Churchill et al 2015). Para definir este tipo de trastorno neuropsiquiátrico, se clasificó el HAND en tres niveles, Deterioro cognitivo asintomático (ANI, por sus siglas en inglés), Trastorno neurocognitivo leve (MND, por sus siglas en inglés), y demencia asociada al VIH (HAD, por sus siglas en inglés) (Mitra & Sharman, 2023). El desarrollo de HAND en estos pacientes, si bien no disminuye su longevidad, si repercute en su calidad de vida. Los pacientes que cursan con esta patología, en donde se ve afectada la cognición, tienen más probabilidades de estar desempleados, les resulta difícil conducir y dependen más de los demás para sus actividades de la vida diaria como cocinar, comprar, realizar tareas financieras y de navegación por internet (Smail y Brew, 2018). Se ha
Análisis funcional del ARN largo no codificante malat-1 en macrófagos murinos infectados por Brucella abortus.
(Universidad de Concepción, 2021) Ruiz Sanhueza, Sebastián Gabriel; Oñate Contreras, Ángel Alejandro
Las bacterias del género Brucella son el agente etiológico de la Brucelosis, una de las zoonosis más extendidas a nivel mundial. Focalizándose principalmente en países de bajos ingresos, esta enfermedad produce un elevado costo socioeconómico en el área ganadera y representa un grave problema sanitario por su transmisión al ser humano. Brucella spp. es un patógeno sigiloso que invade la mucosa epitelial de las vías aéreas y digestivas provocando una débil respuesta pro-inflamatoria, estableciendo su nicho replicativo en los macrófagos del huésped, inhibiendo su apoptosis y alterando su capacidad bactericida e interacción con los demás componentes de la respuesta inmune. Estas capacidades efectoras están determinadas por un proceso de activación fuertemente regulado a nivel transcripcional, conocido como polarización de macrófagos. En la última década, los ARNs largos no codificantes han surgido como potenciales blancos terapéuticos en el estudio de diversas patologías, debido a su rol como reguladores transcripcionales en un número creciente de procesos biológicos. Investigaciones recientes identificaron al ARN largo no codificante Malat-1 como un regulador transcripcional fundamental en el proceso de polarización de macrófagos, relacionándose estrechamente con la capacidad efectora de estas células. El presente proyecto tiene como objetivo determinar la función de Malat-1 en el proceso de activación de macrófagos murinos infectados por Brucella abortus, para lo cual se caracterizará fenotípicamente a dos líneas celulares de macrófagos murinos a través de la producción de citoquinas y la expresión de marcadores de membrana en relación a la expresión relativa de Malat-1. Además, se realizará un análisis funcional de Malat-1 silenciando su actividad en macrófagos murinos previo a la infección, con el objetivo de determinar cambios en el fenotipo y capacidad bactericida de estas células. A través de estas determinaciones, se espera comprobar que Malat-1 aumenta su expresión en macrófagos infectados por Brucella abortus de manera crucial para su correcta activación y capacidad bactericida, aportando una nueva capa de complejidad al estudio de la polarización de macrófagos y representando un enfoque novedoso en el estudio de la Brucelosis, con la posibilidad de extrapolar estos resultados al estudio de otras enfermedades infecciosas.
Análisis mutacional de marcadores STR en estudios de paternidad dentro de la población chilena en el Servicio Médico Legal.
(Universidad de Concepción, 2024) Arriagada Isla, Paula Ignacia; Zúñiga Arbalti, Felipe Andrés; Téllez Igor, Jaime
La unidad de Genética Forense del Servicio Médico Legal realiza peritajes de paternidad mediante el análisis genético de un tipo de polimorfismo de ADN denominado Short Tandem Repeats (STR). Los STR son secuencias cortas de ADN muy variables y con elevadas tasas de mutación. En la población chilena, estas tasas se desconocen, siendo el objetivo de este estudio analizar el perfil genético de la población chilena a través de la observación de mutaciones en 15 loci STR, utilizando métodos estadísticos junto con un análisis del comportamiento mutacional de estos marcadores, con el propósito de no depender de las tasas mutacionales globales de la Association for the Advancement of Blood & Biotherapies. Todo esto mediante una recopilación de datos provenientes de la población chilena y la aplicación de cálculos estadísticos relacionados a la matemática Forense. Se analizaron 236 mutaciones de origen paterno de las cuales 230 fueron identificadas como mutaciones tipo slipp y 6 como indeterminadas en donde 143 mutaciones mostraron una tendencia hacia la ganancia, destacando aquellas de un solo salto y 93 hacia la pérdida de secuencias STR. A nivel poblacional los marcadores con más altas tasas de mutación fueron los loci FGA, vWA y D13S317, demostrándose en general que en los 15 loci analizados hubo una variación respecto a las tasas utilizadas actualmente de la base de datos global por la AABB.
Asociación de citoquinas con secuelas funcionales del pulmón en pacientes recuperados de COVID-19.
(Universidad de Concepción, 2021) Sanhueza Novoa, Sergio Andrés; Nova Lamperti, Estefanía Andrea; Labarca Trucios, Gonzalo Patricio
El síndrome respiratorio agudo severo corovavirus-2 (SARS-CoV-2) es el agente etiológico de la enfermedad por Coronavirus 2019 (COVID-19). La patología puede desarrollarse con distinta severidad entre los pacientes, desde una etapa leve, moderada a severa, siendo característico entre los enfermos críticos una marcada liberación de proteínas inflamatorias y el desarrollo del síndrome respiratorio agudo severo (SARS), el cual sigue siendo hasta el día de hoy la principal complicación médica en los infectados. Con el paso del tiempo la COVID-19 severa se ha asociado con secuelas pulmonares sostenidas después de la fase aguda, sin embargo, los mediadores inflamatorios asociados con la disfunción pulmonar tras superar la COVID-19 siguen siendo desconocidos. El objetivo de este estudio fue identificar citoquinas y quimioquinas asociadas con disfunción pulmonar 6 y 12 meses post-COVID-19 en pacientes con enfermedad leve, moderada y severa. Para aquello se reclutaron 60 pacientes COVID-19 del Hospital Víctor-Rios-Ruiz, 6 y 12 meses después de la fase aguda, obteniendo en estos periodos de tiempo muestras de suero para determinar 6 citoquinas y 4 quimioquinas. La cuantificación de las proteínas se realizó utilizando un ensayo de array por citometria de flujo. Las secuelas respiratorias de los pacientes postCOVID-19 se analizaron midiendo el daño estructural del pulmón a través de tomografías computarizadas de tórax (TCT), además de analizar las secuelas xi funcionales del pulmón a través de los exámenes de espirometría y difusión de monóxido de carbono pulmonar (DLCO). Nuestros datos mostraron que 22 pacientes presentaban deterioro de la función pulmonar 6 meses después de la infección por COVID-19. Luego de identificar a los pacientes con secuelas pulmonares, observamos que CXCL-9, CXCL10 e IL6 fueron los principales mediadores inflamatorios asociados con la disfunción pulmonar a los 6 meses. Finalmente, del grupo de pacientes con secuelas funcionales a nivel pulmonar a los 6 meses, comparamos la presencia de citoquinas entre los pacientes que recuperaron la función pulmonar a los 12 meses y los pacientes que mantuvieron disfunción pulmonar, observando que los niveles de CXCL-9, CXCL10 e IL-6 a los 6 meses aumentaron en el grupo de pacientes que mantuvieron la disfunción pulmonar 12 meses después del COVID-19. De esta forma es que los niveles elevados de CXCL-9, CXCL-10 e IL6 se asocian con secuelas en la funcionalidad pulmonar a largo plazo después de COVID-19. Volviéndose interesante estudiar, en investigaciones a futuro, el mecanismo patológico por el cual estas proteínas inflamatorias logran contribuir a la disfunción pulmonar en los pacientes que superan la patología.
Asociación de citoquinas con secuelas funcionales del pulmón en pacientes recuperados de COVID-19.
(Universidad de Concepción, 2021) Sanhueza Novoa, Sergio Andrés; Nova Lamperti, Estefanía Andrea; Labarca Trucios, Gonzalo Patricio
El síndrome respiratorio agudo severo corovavirus-2 (SARS-CoV-2) es el agente etiológico de la enfermedad por Coronavirus 2019 (COVID-19). La patología puede desarrollarse con distinta severidad entre los pacientes, desde una etapa leve, moderada a severa, siendo característico entre los enfermos críticos una marcada liberación de proteínas inflamatorias y el desarrollo del síndrome respiratorio agudo severo (SARS), el cual sigue siendo hasta el día de hoy la principal complicación médica en los infectados. Con el paso del tiempo la COVID-19 severa se ha asociado con secuelas pulmonares sostenidas después de la fase aguda, sin embargo, los mediadores inflamatorios asociados con la disfunción pulmonar tras superar la COVID-19 siguen siendo desconocidos. El objetivo de este estudio fue identificar citoquinas y quimioquinas asociadas con disfunción pulmonar 6 y 12 meses post-COVID-19 en pacientes con enfermedad leve, moderada y severa. Para aquello se reclutaron 60 pacientes COVID-19 del Hospital Víctor-Rios-Ruiz, 6 y 12 meses después de la fase aguda, obteniendo en estos periodos de tiempo muestras de suero para determinar 6 citoquinas y 4 quimioquinas. La cuantificación de las proteínas se realizó utilizando un ensayo de array por citometria de flujo. Las secuelas respiratorias de los pacientes post COVID-19 se analizaron midiendo el daño estructural del pulmón a través de tomografías computarizadas de tórax (TCT), además de analizar las secuelas funcionales del pulmón a través de los exámenes de espirometría y difusión de monóxido de carbono pulmonar (DLCO). Nuestros datos mostraron que 22 pacientes presentaban deterioro de la función pulmonar 6 meses después de la infección por COVID-19. Luego de identificar a los pacientes con secuelas pulmonares, observamos que CXCL-9, CXCL10 e IL 6 fueron los principales mediadores inflamatorios asociados con la disfunción pulmonar a los 6 meses. Finalmente, del grupo de pacientes con secuelas funcionales a nivel pulmonar a los 6 meses, comparamos la presencia de citoquinas entre los pacientes que recuperaron la función pulmonar a los 12 meses y los pacientes que mantuvieron disfunción pulmonar, observando que los niveles de CXCL-9, CXCL10 e IL-6 a los 6 meses aumentaron en el grupo de pacientes que mantuvieron la disfunción pulmonar 12 meses después del COVID-19. De esta forma es que los niveles elevados de CXCL-9, CXCL-10 e IL 6 se asocian con secuelas en la funcionalidad pulmonar a largo plazo después de COVID-19. Volviéndose interesante estudiar, en investigaciones a futuro, el mecanismo patológico por el cual estas proteínas inflamatorias logran contribuir a la disfunción pulmonar en los pacientes que superan la patología.
Asociación de la ingesta de vitamina A y vitamina C con el perfil lipídico y el rol mediador de enzimas antioxidantes en población chilena hipercolesterolémica.
(Universidad de Concepción, 2023) Ramos Pardo, Sofía Cristina; Martorell Pons, Miquel
Las enfermedades cardiovasculares (ECV) son la primera causa de muerte a nivel mundial. Dentro de las ECV un factor de riesgo importante es la aterosclerosis que se desarrolla por la hipercolesterolemia. Los alimentos que contienen altos niveles de fitoquímicos, antioxidantes y fibra contribuyen a regular los niveles de estrés oxidativo presente en estas patologías y potencian la actividad de enzimas antioxidantes presentes en el organismo humano. Se desconoce si existe un rol mediador de enzimas antioxidantes endógenas sobre la asociación entre antioxidantes exógenos y perfil lipídico. Por lo anterior, el objetivo de la presente propuesta es estudiar la asociación de antioxidantes exógenos con lípidos circulantes y la potencial mediación por enzimas antioxidantes en sujetos con hipercolesterolemia. Se reclutaron 67 sujetos hipercolesterolémicos para evaluar su ingesta de vitamina A y vitamina C, además de medir la actividad enzimática de superóxido dismutasa y catalasa en plasma. Dentro de los resultados existe una asociación entre la ingesta de vitamina A y el colesterol LDL. Se concluye que el consumo vitamina A está asociado al colesterol LDL y no hay actividad enzimática de superóxido dismutasa o catalasa mediando esta asociación. Se espera que este estudio sirva como base para averiguar los mecanismos de esta asociación.
Asociación entre el SNP rs12654778 del receptor adrenérgico β-2, presión arterial, biomarcadores lipídicos y otros marcadores cardiometabólicos en población adulta chilena.
(Universidad de Concepción, 2021) González Contreras, Carlos Alexander; Martorell Pons, Miquel; Villagrán Orellana, Marcelo
La hipertensión arterial (HTA), dislipidemias, diabetes mellitus tipo 2 y obesidad se han asociado con diversos polimorfismos del gen ADRB2, contribuyendo en la fisiopatología de estas alteraciones. El SNP rs12654778 del gen ADRB2 ha sido poco estudio y no existen estudios en población chilena. Hipótesis: El alelo de riesgo del SNP rs12654778 del gen ADRB2 se asocia con alteraciones metabólicas en población chilena adulta. Objetivo: Investigar la asociación del SNP rs12654778 del gen ADRB2 con marcadores cardiometabólicos en población adulta chilena. Metodología: Análisis estadístico de asociación entre estos parámetros con el SNP rs12654778 del gen ADRB2 utilizando modelos de ajuste que incluyeron variables de confusión pertinentes. Resultados: Asociación entre el SNP rs12654778 del gen ADRB2 y reducción en los niveles cLDL. No hubo asociación con ningún otro parámetro. Conclusión: Genotipo AA actúa de forma protectora frente a niveles de cLDL, no existe asociación entre el SNP rs12654778 y los demás parámetros medidos, se plantea un mecanismo molecular donde se involucra el SNP rs12654778 en la reducción de los niveles de cLDL. Este es el primer estudio realizado en Chile y uno de los pocos en el mundo que asocia al SNP rs12654778 del gen ADRB2 con marcadores cardiometabólicos.
Autoevaluación de la gestión de procesos analíticos del Laboratorio DAS Hualqui en base a los estándares de acreditación de atención abierta.
(Universidad de Concepción, 2023) Gálvez Acuña, Felipe Eduardo; Lamperti Fernández, Liliana Ivone
El presente proyecto pretende contribuir a generar las bases para una futura oportunidad de acreditación del CESFAM de Hualqui bajo los lineamientos de la acreditación de salud a nivel nacional. La cual hace referencia a un proceso periódico de evaluación, al cual se someten las entidades prestadoras de salud. Esta acreditación desagrega sus exigencias y requisitos en ámbitos, componentes, características y verificadores; en donde en este proyecto se enfocará en el área del Laboratorio DAS Hualqui hacia el área de toma de muestras del CESFAM Hualqui, CECOSF Hualqui, Postas Rural Quilacoya y Talcamávida; y Estación Médico Rural Unihue, las cuales envían muestras al laboratorio. De la pauta de cotejo del Manual del Estándar General de Acreditación para Prestadores Institucionales de Atención Abierta nos enfocaremos en los Servicios de Apoyo – Laboratorio Clínico (APL), el cual posee cinco características APL, de las cuales nos centraremos en cuatro. El proyecto contempla tres etapas: La primera un levantamiento de información para realizar un diagnóstico por parte del Laboratorio DAS Hualqui, hacia el área de Toma de Muestras. Esta primera etapa será con el fin de determinar qué puntos de verificación se están cumpliendo y cuales debemos mejorar de acuerdo a lo que nos exige la pauta de cotejo para la futura acreditación. Una vez verificado los elementos medibles que exige cada característica se procederá a la segunda etapa del proyecto que será la elaboración de propuestas para mejorar los puntos de verificación faltantes. En paralelo a estas etapas del proyecto, una tercera etapa se llevará a cabo, midiendo el Control de Calidad Interno y Externo de la sección de Química Clínica, con la finalidad de evaluar el desempeño de calidad en esta área.
Biotransformación y/o degradación de diclofenaco por hongos con actividad lignolítica.
(Universidad de Concepción, 2020) Lobos Vargas, Carla Catalina; Becerra Allende, José Violido
Cada día es más preocupante la contaminación del agua, debido a la escasez que existe actualmente de este elemento esencial para la vida. Los contaminantes emergentes son moléculas que llegan al medio ambiente producto de la actividad diaria del humano. En este grupo se encuentra una variada cantidad de moléculas entre las cuales se incluyen los fármacos. Estos llegan a las aguas residuales al ser eliminados del organismo luego de ser administrados o desechados y como residuos de su uso a nivel industrial. Si bien la OMS indica que las concentraciones son tan bajas que no presentarían riesgo alguno para la salud humana, existen estudios que han demostrado que a bajas concentraciones causan alteraciones en animales acuáticos y no acuáticos, llevando incluso a la muerte de algunas especies. Dentro de las posibles soluciones de este invisible pero gran problema se encuentra la bioremediación. Ésta es una tecnología donde se utilizan organismos biológicos completos o partes de ellos para disminuir los contaminantes de un medio. Se ha demostrado que hongos con enzimas capaces de degradar la lignina de la madera pueden degradar diversos contaminantes incluyendo medicamentos. En este estudio se analiza la actividad de dos hongos, Trametes hirsuta y Trametes versicolor para degradar diclofenaco de un medio acuoso que contenía 0.1 mg/L. Se extrajeron muestras a las 6 y después de las 48 horas de la administración del fármaco en el medio con el hongo. La determinación se realizó por HPLC utilizando un patrón de diclofenaco como estándar. Los resultados obtenidos demostraron que, si bien Trametes hirsuta presenta actividad para degradar el fármaco, ésta no fue mayor que la de Trametes versicolor, lográndose en este último una degradación del 64,7% % a las 48 horas.
Búsqueda de profagos asociados a carbapenemasas en Pseudomonas aeruginosa.
(Universidad de Concepción, 2023) Amsteins Romero, Luis Alexis; Opazo Capurro, Andrés Felipe
Por décadas la resistencia a los antibióticos ha sido un desafío complejo en el mundo científico que se dedica a dilucidar los distintos mecanismos y formas por las cuales las bacterias llegan a resistir las terapias antibióticas disponibles, sobre todo las de última línea que incluye a los carbapenémicos. Los esfuerzos para describir nuevos mecanismos de resistencia o monitorear cambios en los ya descritos ha sido una ardua labor, especialmente el incremento de aparición de carbapenemasas. La movilidad y transferencia de los genes de resistencia a antibióticos crece en enigmas, a pesar de conocerse algunas formas de transferencia horizontal de genes. Como objetivo planteamos la búsqueda de profagos asociados a carbapenemasas. Se analizó el genoma de 40 cepas de P. aeruginosa resistentes a carbapenémicos aisladas de hospitales chilenos, de estas 34 portaban carbapenemasas. El análisis filogenético identificó 19 cepas pertenecientes a un ST-654 considerado de alto riesgo y las restantes se clasificaron en otros que también incluyen clones peligrosos. Del total de cepas productoras de carbapenemasas, dos cepas por análisis in silico tienen un potencial de asociación entre profagos y el gen blaVIM. Pudo concluirse que el análisis in silico es una forma de aproximación interesante para detectar la relación entre profagos y determinantes de resistencia a antibióticos, ya que idealmente se requiere el cierre del cromosoma y/o plásmidos para confirmar los resultados, lo cual requiere de otra técnica de secuenciación.
Caracterización de anticuerpos monoclonales para la cuantificación de fosfolipasa A2 asociada a lipoproteína.
(Universidad de Concepción, 2020) Gutiérrez Salamanca, Nataly Andrea; Bustos Araya, Alejandra María Paulina; Castillo Vidal, Daniela Andrea
Las enfermedades cardiovasculares (ECVs) son las enfermedades con mayor tasa de mortalidad a nivel internacional y en Chile. La mayoría de las ECVs son causados por la aterosclerosis, por lo que se utilizan modelos de predicción para evaluar el riesgo cardiovascular; sin embargo, existen sobreestimaciones y subestimaciones en cada tabla de estratificación dado que son desarrolladas en poblaciones específicas. La fosfolipasa A2 asociada a lipoproteína (Lp-PLA2) es un biomarcador que aumenta en la aterosclerosis, pudiendo ser una herramienta de evaluación complementaria para la predicción del riesgo cardiovascular; no obstante, los kits comerciales para cuantificar Lp-PLA2 poseen un alto costo, por lo que es un marcador de segunda línea. En este trabajo se cultivaron hibridomas productores de anticuerpos anti-LpPLA2, fueron caracterizados mediante ELISA indirecto y se produjo fluido ascítico en ratones para la obtención de un anticuerpo monoclonal purificado y específico para Lp-PLA2 recombinante. En conclusión, la obtención del anticuerpo monoclonal 2A7G6 específico para Lp-PLA2 recombinante podría contribuir a la estandarización de un inmunoensayo para su cuantificación plasmática.
Caracterización de genes expresados diferencialmente en pedicelo de uva de mesa en respuesta a desgrane por tratamiento con ácido giberélico.
(Universidad de Concepción, 2022) Carrasco Pérez, Carlos Felipe; Urrutia Briones, Homero Enrique
La susceptibilidad al desgrane de ciertos genotipos de uva de mesa está asociada a la expresión diferencial de genes expresados en el pedicelo en respuesta al tratamiento con ácido giberélico (GA3). Se caracterizaron genes diferencialmente expresados en la estructura en genotipos susceptibles a desgrane por tratamiento con ácido giberélico. Para ello se estudió la expresión de genes identificados mediante análisis transcriptómico (ARN-Seq) por comparación de muestras tratadas y no tratadas con la fitohormona y seleccionándolas a partir de su función biológica asociada al fenotipo (desgrane). Estos genes se validaron mediante análisis PCR tiempo real comparando muestras de ARN obtenidas de variedades que presentan diferentes respuestas contrastantes al desgrane frente a aplicaciones de GA3 y sus respectivos controles. Esto se realizó con la toma de muestras en diferentes estados fenológicos para observar su perfil de expresión a lo largo del desarrollo de la baya. Un total de 9 genes fueron seleccionados para ser analizados: VvPAL, VvCCOAOMT, VvRAP2-3, VvCCR1, VvMETK5, VvLAC12, VvGA2ox8, VvDCR y VvJMT. Estos genes presentaron una expresión diferencial y posteriormente podrían servir para desarrollar marcadores de selección para descartar progenitores y variedades con propensión a desgrane.
Caracterización de la expresión de proteínas pertenecientes a la familia de eph/efrinas de tipo a en el techo diencefálico de embriones de gallus gallus.
(Universidad de Concepción, 2022) Aguayo Cisterna, Jaime Alexis; Caprile Elola-Olaso, Teresa
Una fase crítica del desarrollo temprano del sistema nervioso es el establecimiento de conexiones adecuadas entre neuronas y sus células objetivo. La formación de estas "redes" está controlada por la capacidad del axón para percibir e integrar diversas señales del medio. En animales bilaterales, la línea media es un punto de decisión, en el que axones pueden decidir si cruzar o no, en respuesta a moléculas que actúan como señales de guía. La comisura posterior (CP) es un tracto axonal situado en la placa del techo diencefálico (PTD). Análisis de hibridación “in situ” mostraron que EphA7, un receptor de efrina, se expresa en la PTD, y su inhibición afecta el desarrollo de esta estructura, incluyendo la guía axonal en la CP. La familia Eph/efrina está compuesta por varios miembros que suelen actuar en grupo. Nos propusimos determinar la expresión transcriptómica y proteica de Eph/efrina tipo A durante el desarrollo de la PTD. La expresión del ARNm de Eph/efrina se analizó mediante análisis bioinformático de los datos obtenidos por ARNseq de la PTD (4-7 días de desarrollo de embriones de pollo) y validado por RT-qPCR. La expresión de proteínas se analizó mediante ensayos de western blot (WB) con anticuerpos contra las moléculas Eph/efrina y mediante inmunohistoquímica (IHC) en corte. El análisis mostró la expresión diferencial del ARNm de Eph/efrina, validada por RT-qPCR. El ensayo WB y la IHC mostraron la expresión de varios miembros en la PTD. Nuestros resultados sugieren que las moléculas Eph/efrina se expresan en la PTD, permitiendo el correcto desarrollo de esta región.
Caracterización de la expresión del receptor de Neurotrofinas P75 en modelo murino de dolor neuropático.
(Universidad de Concepción, 2024) Recabarren Cancino, Sofía Belén; Pérez Fernández, Viviana Ivonne
El dolor neuropático, una aflicción con impacto significativo en la calidad de vida de los pacientes, surge de una lesión o enfermedad del sistema somatosensorial. La señalización molecular del dolor crónico ha sido vinculada con alteraciones en la expresión y función de neurotrofinas y sus receptores Trks y p75, de alta y baja afinidad respectivamente. Durante el dolor neuropático, incrementa la expresión de neurotrofinas junto a sus receptores específicos Trks. Sin embargo, aun cuando existe evidencia que relaciona la participación de p75 en la regulación neurofisiológica del dolor, su estudio no ha sido ampliamente abordado. Esta investigación caracterizó la expresión y función del receptor p75 durante el dolor neuropático en modelos murinos, enfocándose principalmente en los cambios moleculares que ocurren en la medula espinal. Los resultados obtenidos mostraron un incremento de la expresión de p75 en la médula espinal, la expresión de este receptor en las láminas más externas del asta dorsal y la activación de proteínas ERK, implicadas en la mantención del dolor neuropático a través del tiempo. Al comprender la participación del receptor p75 en la neurofisiología del dolor, se busca contribuir al estudio de las neurotrofinas en el dolor neuropático y colaborar en la propuesta de nuevos blancos terapéuticos para la neurofarmacología del dolor.